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胃癌在全世界范围内是发病率最高的癌症之一,在中国它的死亡率居第二位。血小板反应素(thrombospondins,THBS)是一组多功能的细胞间质糖蛋白,对肿瘤的发生、发展起重要的调控作用。本研究探讨了THBS的表达及其单核苷酸多态性与胃癌发生、发展的关系,为胃癌临床诊断、治疗和预后评价提供理论基础和实验依据。1. THBS-1在胃癌中的表达及临床意义本研究应用Real-time PCR技术检测82例原发性胃癌及癌旁组织中的THBS-1 mRNA表达水平,通过免疫组化方法观察THBS-1, a-SMA,CD34在胃癌中的表达情况,分析THBS-1 mRNA表达与胃癌病理学特征的关系,结果:1.癌组织中THBS-1mRNA的表达水平高于癌旁组织,而且其mRNA表达水平与淋巴结转移、肿瘤大小及年龄密切相关。2. THBS-1蛋白主要表达在癌巢周围的肌成纤维细胞上,而在胃癌细胞上不表达。3.胃癌间质中肌成纤维细胞的丰度与肿瘤淋巴结的转移及肿瘤的生长密切相关。结论:本研究首次揭示在胃癌的发展过程中THBS-1可能作为TGF-?的激活剂,以刺激胃癌间质中成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,从而促进胃癌的生长和淋巴结转移。2. THBS家族的其他成员在胃癌中的表达及临床意义本研究利用Real-time PCR技术检测82例原发性胃癌及癌旁组织中的THBS-2,-3,-4 mRNA表达水平,用免疫组化方法观察MMP-9,CD34在胃癌中的表达情况,探讨THBS mRNA表达水平与胃癌临床病理学特征、MVD及MMP-9表达的关系。结果:1. THBS-2,THBS-4 mRNA在胃癌组织中的表达水平高于癌旁,两者的差别具有统计学意义。2.THBS-4 mRNA在胃癌中的表达水平与肿瘤大小、组织分型及淋巴结转移等临床病理学特征密切相关。4.胃癌组织中THBS-4 mRNA表达水平与MVD呈正相关(R=0.67,P <0.01)。5. THBS-4 mRNA的表达水平与MMP-9表达密切相关(P =0.008)。结论: THBS-2可能与胃癌的发生有关;THBS-4在胃癌发生和发展中起重要的作用;THBS-4可能通过调节胃癌新血管生成和MMP-9的表达,影响肿瘤生长与淋巴结转移。THBS-4有可能成为胃癌不良预后的一个新指标。3.THBS1-1,-2单核苷酸多态性与胃癌发生、发展的关系我们通过病例-对照研究,采用PCR-RFLP及MALDI-TOF-MS技术方法,检测胃癌和正常人群各283例中的THBS-1基因rs2292305、rs2236741、rs2228261、rs3743125和THBS-2基因rs8089、rs1132742等位点的基因多态性,结合临床病理资料,对THBS基因家族中THBS-1,THBS-2遗传变异与肿瘤易感性的关系进行研究。结果:1.在肠型病例组中, THBS-1rs2292305位点携带CC基因型个体患胃癌的风险是携带CT或TT患者的的2.1倍(OR=2.1,95 % CI:1.12-3.82; P=0.025);说明rs2292305的携带CC基因型的个体胃癌患病的风险明显增加。而携带TT基因型的个体发生侵袭转移的风险低于携带CT或TT患者,表明携带TT基因型的患者能降低肿瘤发生侵袭转移的风险度。2.在肠型病例组中,THBS-1rs3743125位点及rs2228261位点携带CC基因型的个体发生淋巴结转移的概率低于携带CT+TT基因型的患者(OR=0.41,95 (%) CI:0.24-2.95; P=0.036;OR=0.29,95 (%) CI: 0.15-5.1; P=0.03),表明携带CC基因型的患者发生肿瘤侵袭转移的风险度明显降低。3.THBS-2 rs1132742位点的多态性与胃癌的分化密切相关。4.在弥漫型病例组中,THBS-2 rs8089位点携带TT基因型的个体发生浸润的概率是携带GT +GG患者的2.6倍(OR=2.6,95 (%) CI; P=0.043),说明在弥漫型病例组中该位点的携带TT基因型个体发生肿瘤侵袭的风险明显增加。5.通过PHASE软件构建四个THBS-1主要的单体型,即CCTC、TTCT、CTCT、CCTC,经过统计分析,发现携带THBS-1 CCCC单体型个体胃癌发病的风险显著增加。结论:THBS-1 rs2292305、rs3743125、rs2228261位点和THBS-2 rs8089位点的多态性与胃癌的发生、发展密切相关。THBS-1的CCCC单体型能增加胃癌发病的风险,它可能成为一个胃癌遗传易感的分子标记。总之, THBS基因家族在胃癌的发生、发展中起了重要作用。