研究背景与目的:肺癌是全球主要的恶性肿瘤,非小细胞肺癌（Non-small C ell Lung Cancer,NSCLC）作为肺癌典型的病理组织学类型之一,在原发性肺癌病例中诊断率超过85%。NSCLC常规的治疗方案主要采取以手术、化疗和放疗为主的多学科综合治疗模式,但是因其具有高度侵袭性和转移性,非小细胞肺癌的五年生存率尚未取得较为满意的效果。尽管近几年来靶向治疗和免疫治疗的出现较明显改善了肺癌的疗效,然而其耐药性及其不良反应在部分程度上限制了非小细胞肺癌患者的治疗效果。因此,从分子水平深入探索肺癌的发生发展机制,筛选和鉴定调控肺癌侵袭转移的潜在致病基因有助于在临床实践中早期发现非小细胞肺癌。上皮间质转化（Epithelial M esen ch ym al Tr an si tion,E M T）作为促进癌细胞发生侵袭和迁移的主要机制之一,是非小细胞肺癌发生转移的起始和关键性因素,据报道ARHGAP10在肿瘤细胞迁移、粘附和肌动蛋白细胞骨架动态重组等多种生物学行为中具有着十分重要的作用,然而,ARHGAP10表达与非小细胞肺癌细胞上皮间质转化间的相关性尚不清楚,有待进一步探索。在本研究中,我们探讨ARHGAP10参与调控非小细胞肺癌EMT的进程与肿瘤发生的机制。方法:1.应用RT-q PCR和Western blot检测正常人肺上皮细胞BEAS-2B和SK-MES-1、A549、H1299、H1975等非小细胞肺癌株中ARHGAP10的m RNA和蛋白表达情况;2.通过慢病毒（Lentivirus）包装、感染及筛选等步骤构建稳定过表达ARHGAP10的NSCLC细胞株A549和H1299,si RNA干扰体系构建瞬时敲减ARHGAP10的NSCLC细胞H1975,对构建的非小细胞肺癌细胞株进行实验分组如下:将过表达或敲减ARHGAP10基因的NSCLC细胞株定义为过表达组（A549-ARHGAP10、H1299-ARHGAP10）和干扰组（H1975-si ARHGAP10）,将空载体的NSCLC细胞株定义为对照组（A549-mock、H1299-mock、H1975-si NC）;3.采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）、Transwell侵袭实验、细胞划痕技术测定ARHGAP10基因对NSCLC细胞的增殖活力、侵袭及迁移能力的影响;PhalloidinFITC荧光染色检测ARHGAP10基因对NSCLC细胞伪足形成和骨架重塑的影响;4.运用Western blot和免疫荧光检测A549-ARHGAP10、A549-mock和H1299-ARHGAP10、H1299-mock中EMT蛋白（E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Snail）的表达情况以及信号转导通路PI3K/Akt/GSK3β轴关键标志蛋白的表达水平;使用100ng/ml的IGF-1孵育细胞24h后检测不同分组细胞株中EMT标志蛋白的表达水平及对细胞增殖、侵袭的影响。结果:1.A549、H1299、H1975、SK-MES-1中ARHGAP10表达显著低于正常肺上皮,成功地建立了ARH GAP10稳定过表达NSCLC细胞株和ARH GAP10瞬时敲减NSCLC细胞株;2.ARHGAP10基因过表达的A549和H1299细胞增殖、侵袭和迁移水平显著降低,而ARHGAP10基因敲减的H1975细胞结果完全相反;细胞骨架实验显示过表达ARHGAP10后,细胞骨架纤维及伪足等明显减少,提示过表达ARHGAP10基因对细胞运动能力起抑制作用;3.Western blot和免疫荧光结果表明,在ARHGAP10过表达的NSCLC细胞中,EMT标志性蛋白E-Cadherin表达显著上调,然而S nail、N-Cad herin和Vimen tin等蛋白的表达明显下调。同时我们进一步探讨了ARH GAP10参与EMT的机制,发现PI3K/Akt/GSK3β信号转导通路中关键标志蛋白PI3 K、p-Akt和p-GSK3β的表达水平显著下调。提示ARHGAP10可能通过PI3K/Akt/GSK3β信号转导通路抑制NSCLC细胞EMT的过程,进一步通过挽救实验发现加入PI3K/Akt通路激活剂IGF-1（100ng/ml）后可以显著回复ARHGAP10对NSCLC细胞EMT的抑制作用。结论:研究结果表明ARHGAP10在非小细胞肺癌细胞中显著低表达,并与非小细胞肺癌细胞EMT密切相关。过表达ARHGAP10基因可显著抑制非小细胞肺癌细胞增殖,削弱非小细胞肺癌细胞侵袭及迁移能力;敲减ARHGAP10则表现出相反的结果。进一步研究结果表明ARHGAP10可通过调节PI3K/Akt/GSK3β轴信号转导通路抑制NSCLC上皮间质转化,从而有效抑制NSCLC细胞恶性生物学行为。