论文部分内容阅读
目的:卵巢恶性肿瘤是女性生殖器三大恶性肿瘤之一,由于其发病隐匿,缺乏特异性早期发病指征,往往在确诊时就已发生转移,因此卵巢癌患者的5年生存率仅30%左右,其死亡率居妇科恶性肿瘤首位。虽然迄今卵巢癌的病因和发病机制尚不明确,但已有研究表明,血管生成在包括卵巢癌在内的人类实体肿瘤的发生、发展和浸润、转移中起重要作用。在已知的血管生成因子中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一种特异的、强烈的血管内皮细胞促分裂因子和血管生成因子,它与肿瘤的生长、浸润及转移密切相关。人类的VEGF基因启动子区存在一些多态性位点,这些多态性位点可能通过改变基因的转录活性而影响蛋白的表达,导致了人类对癌症易感性的个体差异。本研究旨在探讨VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与上皮性卵巢癌发病风险的关系,从分子生物学水平为卵巢癌的预防及诊治提供依据。方法:本研究采用病例-对照研究方法,收集303例上皮性卵巢癌患者和303例健康对照个体的静脉抗凝血各5ml,同时记录其病史和个人及家族相关资料。采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction -restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法检测VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T基因多态位点的基因型频率分布。数据统计分析采用SPSS11.5版软件包(SPSS Company, Chicago, Illinois, USA)进行。病例组与对照组的年龄差异行t检验。比较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行卡方检验行Hardy-Weinberg平衡分析。两组间的基因型分布比较采用行×列表χ2检验。以非条件Logistic回归法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及95%可信区间(confidence interval, CI)。采用EH软件和2LD软件分别分析VEGF基因启动子区-460C/T,-1154 G/A 2个多态性位点的单倍型频率和等位基因连锁不平衡状态。P<0.05作为差异有显著性的标准。结果:1.健康对照组中VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T两个多态位点基因型频率分布均符合Hardy-weinberg平衡(P﹥0.05)。2.在卵巢癌组和对照组中,VEGF基因启动子区-1154G/A多态的三种基因型频率(A/A、G/A、G/G)分别是1.7%、17.8%、80.5%和2.3%、26.1%、71.6%,两组比较差异有统计学意义(P=0.037);在卵巢癌组和对照组中,等位基因频率分布(G、A)分别是89.4%、10.6%和84.7%、15.3%,两组比较差异有统计学意义(P=0.013);与G/A+ A/A基因型相比,携带G/G基因型可能明显增加上皮性卵巢癌的发病风险(OR=1.64,95%CI=1.12~2.39)。3. VEGF基因启动子区-460C/T多态C、T等位基因频率在卵巢癌组和对照组分别为19.3%、21.3%和80.7%、78.7%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);C/C、C/T、T/T基因型频率在卵巢癌组和对照组分别为4.0%、30.7%、65.3%和5.6%、31.4%、63%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);与C/T+T/T基因型相比,T/T基因型可能与卵巢癌的发病风险无关,OR值为1.11(95%CI= 0.79~1.54)。4. VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/T SNPs位点间不存在连锁不平衡(D’=0.426)。结论:1. VEGF基因启动子区-1154G/A多态可能与上皮性卵巢癌的发病风险明显相关,即携带G/G基因型可能显著增加上皮性卵巢癌的发病风险。2. VEGF基因启动子区-460C/T单核苷酸多态可能与上皮性卵巢癌的发病风险无关。3. VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/T SNPs位点间不存在连锁不平衡。