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由于抗生素的不合理使用和滥用,环境中抗生素耐药性问题越来越严重。在抗生素耐药这个全球性问题传播扩散过程中发挥重要作用的抗生素抗性基因逐渐出现在了人们的视野中,引起了民众和国内外研究学者的重视。季铵化合物是一种常用消毒剂和洗涤剂,其与抗生素之间存在着许多相同的耐药机制,其在ARGs的传播扩散过程中可能会起到一定的促进作用。本研究利用荧光定量PCR技术调研了宁波、湖州、温州三个地区流域水环境中48个采样点中QAC抗性基因(qacE△1)、一类整合子基因(intI1)以及12种抗生素抗性基因(sul1、sul2、cfr、cml、fexA、tetA4 tetG、tetQ、tetX、ermB、blaTEM、dfrA1)的基因丰度,用SPSS软件对结果进行相关性分析,比较QAC抗性基因与抗生素抗性基因之间的相关性。在外加QAC和抗生素的环境压力下分别对细菌进行连续培养,环境压力下连续培养30代后撤去环境压力,继续对菌种连续培养30代,定期测量细菌对Tc、Cip、Chl三种抗生素的敏感性,探究QAC环境压力是否能够促进细菌对抗生素的耐药性。并且设计抗生素抗性质粒的接合转移实验,选取五种QAC研究其对携带RP4质粒的供体菌和携带RifR、NalR抗性的受体菌之间接合转移效率的影响。最后采用AnnexinV/PI双染法检测荧供、受体菌在QAC的作用下细胞膜发生的变化,并用DCFH-DA荧光探针检测细菌在受到QAC刺激时产生ROS的情况,探究QAC促进抗性质粒接合转移的作用机制,结果表明:(1)QAC抗性基因在环境中普遍存在,在三个流域的48个采样点中均能检测到qacE△1的存在,其浓度范围在105-1011 copies/L,并且qacE△1与一类整合子基因之间的相关性十分显著,r=0.999,在p<0.01水平上显著相关。12种ARGs中有7种ARGs与QAC抗性基因显著相关,其中QAC抗性基因与抑制酶活性抗性机制的ARGs的相关性最强,核糖体保护蛋白抗性机制的ARGs次之,外排泵抗性机制的ARGs相对较弱。(2)在QAC环境压力和抗生素环境压力下连续培养的细菌对抗生素的敏感性均有一定程度的降低。选取的三种QAC中,在双十二烷基二甲基氯化铵(DDDAC)环境中连续培养的细菌对环丙沙星敏感性降低程度最大,连续培养30代后其抑菌圈直径从25mm减小为19mm。在十二烷基三甲基氯化铵(DTAC)环境中连续培养的细菌对氯霉素敏感性降低程度最大,抑菌圈直径从19mm减小为13mm。在十二烷基二甲基苄基氯化铵(DDBAC)环境中连续培养的细菌对四环素敏感性降低最快,在连续培养到第20代时,其抑菌圈完全消失。当去除QAC环境压力对细菌进行连续培养时,细菌对抗生素的敏感性升高,逐步恢复到初始状态的敏感性水平。(3)实验选取的五种QAC物质均能促进RP4抗性质粒在大肠杆菌种内的接合转移,但促进作用并不完全相同,它们对接合转移效率促进作用大小变化规律为:DDBAC>TDBAC>DTAC>DDDAC>HDBAC。(4)加入QAC后,供、受体菌的细胞膜均发生一定程度的破损,发生细菌凋亡现象。随着加入的QAC浓度的增大,出现早凋和晚凋现象,即细胞膜发生破损的供体菌数量从2.49%上升至95%,破损的受体菌数量从3.81%上升至97.52%。供体菌产生ROS的量从0.31%上升至16.72%,受体菌产生ROS的量从0.01%上升至6.23%。QAC能够使细菌细胞膜发生改变,使细菌细胞膜通透性增大,刺激细菌产生ROS。