报道显示,能产生活性氧的NADPH氧化酶与真菌菌丝的生长及子实体发育相关,而活性氧又作为信号分子能通过直接反应调节多种信号转导、修饰蛋白结构、转录因子和基因,并调节它们的功能。目前在植物和动物细胞中对NADPH氧化酶应对非生物胁迫的机制研究比较多,在真菌中研究比较少。本研究是在我们完成金针菇基因组测序的基础上,根据文献的报道,应用生物信息学分析的技术分析并初步鉴定了金针菇NADPH氧化酶并且构建了其亚基Cdc24应对非生物胁迫机制,以期为金针菇菌丝生长和出菇机制提供一定的理论基础。分析结果表明,金针菇NADPH氧化酶包含6个亚基,分别是:细胞分裂调控蛋白(Cdc24)、NADPH氧化酶同源异构体1(Nox1)、NADPH氧化酶同源异构体2(Nox2)、NADPH氧化酶调节子(NoxR)、蛋白激酶激活子(Bem1)、小GTP酶(Rac1)。本研究在金针菇转录组测序的平台上完成了对上述6个基因的结构分析。并通过系统发育分析、保守结构域、跨膜结构及信号肽的预测进一步证实了金针菇NADPH氧化酶的可靠性。本实验通过对金针菇生物特性的研究实验,得出金针菇最适的pH=6,最适的酸胁迫的pH=4,碱胁迫的pH=11,盐胁迫的最佳浓度为0.8mol/L,H202胁迫的最佳浓度为10mmol/L,但是NADPH氧化酶比较敏感会受到培养基是固体还是液体、培养时间、孵育温度、孵育时间及玻璃纸等因素的影响。通过非生物胁迫处理即抑制剂处理,我们发现金针菇应对非生物胁迫时,NADPH氧化酶会产生活性氧,其中H2O2和O2-都能作为信号分子作用于亚基Cdc24,这表明H202和O2-对不仅对下游的基因起到调控作用,还能对NADPH氧化酶自身起到调控作用。上述结果初步完成了金针菇NADPH氧化酶的鉴定及亚基Cdc24应对非生物胁迫的机制的探索。