众所周知，创伤失血性休克是创伤外科最常见的危重症之一，是多脏器功能衰竭的重要病因之一。近来研究发现在创伤失血性休克的情况下，机体内各脏器（如肝、肺、小肠等）普遍可观察到大量中性粒细胞的聚集、扣押甚至浸润，造成组织水肿，出现炎症反应，同时由于PMN凋亡延迟，不能及时被清除而发生继发性坏死，释放大量的活性氧、自由基等毒性产物使炎症反应进一步扩大，是创伤引发全身炎症反应综合征（SIRS）、多脏器功能不全（MODS）甚至衰竭（MOF）的主要途径。因此，PMN凋亡抑制可能是失控性炎症反应持续发展致SIRS、MODS甚至MOF的重要机制之一。为了从PMN自身寻找其在严重创伤后凋亡抑制的原因，了解PMN凋亡抑制与其胞浆离子浓度的关系，本实验采用大鼠多处骨折、软组织挫伤加一侧股动脉放血建立起临床常见的创伤失血性休克的动物模型，采用：1）流式细胞术Annexin V和PI 双标法对PMN凋亡和坏死进行定量分析；2）紫外分光法检测O2-自由基；3）Fura-2/AM荧光探针技术测胞浆游离钙离子浓度[Ca2+]i；4）Insight-plusIQ 激光扫描共聚焦显微镜检测胞浆游离氢离子浓度[H+]i，用pHi来表示；5) 葡萄球菌法测PMN的吞噬率；6）光学显微镜观察肝、肺组织学改变。研究创伤失血性休克后PMN凋亡与胞浆[Ca2+]i、[H+]i动态变化的关系，探讨其凋亡抑制的机制及钙拮抗剂的调节作用，通过调节PMN胞浆内[Ca2+]i、[H+]i来适度诱导PMN的凋亡，减少过度的炎症反应，可能为MODS的预防和治疗拓展一个新的思路。 结果显示：创伤失血性休克组与假伤对照组各时相点比较：PMN凋亡明显受到抑制，坏死增多(P<0.01)，并随创伤时间延长而愈发明显，此时PMN吞噬功能明显减弱，而O2-的释放量明显增多(P<0.01)，肝、肺组织切片表现为毛细<WP=6>1、 血管内有大量白细胞粘附于血管内壁，血管周围有白细胞浸润，组织水肿。同时可观察到PMN胞浆[Ca2+]i明显升高，4h时相点达到高峰（P<0.01），而[H+]i则略有下降。液体复苏组的变化基本与此相似。2、钙拮抗剂治疗组则显示：除PMN胞浆[H+]i明显升高外(P<0.01)，其他指标与假伤对照组基本相似。肝、肺组织学改变较创伤失血性休克组明显减轻。 结论：1、 创伤失血性休克后PMN的凋亡受到明显抑制，PMN在体内存活时间延长，继发性坏死增多，导致PMN功能受损，活性氧、自由基释放增多，扩大了炎症反应。2、 创伤失血性休克后PMN胞浆内[Ca2+]i的升高、[H+]i的降低可能是PMN凋亡抑制的机制之一。3、 钙拮抗剂能明显降低胞浆[Ca2+]i，并能使细胞内pHi酸化，能减轻对PMN凋亡的抑制，同时还可适度诱导PMN的凋亡，使炎症反应回复平衡，对MODS的预防和治疗有特殊意义