乌芪参苓白术汤联合5-氟尿嘧啶治疗中晚期大肠癌的实验研究

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目的:通过本实验建立小鼠大肠癌模型,观察以健脾益气的主的中药(乌芪参苓白术汤)单独使用及联合化疗药物(5-Fu)对HT29移植性大肠癌小鼠的抑瘤作用及机制。材料与方法:1.实验动物:雄性昆明种小鼠共40只,5-6周龄,体重26±2g,由辽宁中医药大学动物实验中心提供。2.实验药材:本次实验使用的中药饮片购于辽宁中医药大学的附属医院中药局。应用《镐京直指》所记载的参苓白术汤加减,组成及剂量如下:乌梅60g黄芪30g党参20g茯苓10g薏苡仁30g白术20g山药15g甘草5g莲子肉10g白扁豆20g砂仁15g桔梗15g3.造模与分组:小鼠40只给予普通的饲料适应饲养两周的时间。人工条件下培养HT29细胞,于每只健康小鼠左侧胁腹部皮下注射0.2ml制作模型。造模后,同样用随机对照表法按体重高低随机分为四组,分别是:模型组(10只),中药干预组(10只),5-氟尿嘧啶干预组(10只),中药联合5-氟尿嘧啶干预组(10只)。结果:1.一般观察:实验过程中,可观察到小鼠逐渐出现体弱,少动,饮食量、体重明显下降,出现粘液便,毛色无光泽且脱毛现象严重。5-Fu组行动迟缓,脱毛明显。其中5-Fu+中药干预组整体状态最好,行动稍迟缓,少量脱毛。2.光镜下观察,模型组肿瘤细胞生长的比较旺盛,呈现弥漫性的片状生长,其肿瘤细胞的体积相对较大,异型性亦明显,细胞核明显增大,染色较其他组别深,病理性核分裂像较其他组别明显。除模型组外,各个组别的肿瘤细胞生长都受到不同程度的抑制,肿瘤细胞体积相对缩小,核发生固缩,核分裂像均明显的少于模型组。与其他三组相比较,联合组肿瘤细胞的排列较规则,分化的最好,异型性亦最小,病理性核分裂像较少。3.小鼠肿瘤细胞凋亡的检测:各组之间阳性细胞数均有显著性差异(P<0.05)。5-Fu组阳性细胞数最少,5-Fu+中药组阳性细胞数最多。电镜下观察,模型组可见到肿瘤细胞凋亡的早期表现,肿瘤的细胞膜失去连续性,核体积增大,异染色质增多成团块状,并出现边集现象;中药组、西药组及联合组均可见到典型的凋亡小体,其中联合组的数目最多。结论:1.乌芪参苓白术汤与化疗药物5-fu联合应用,可有效地诱导HT-29大肠细胞的凋亡,抑制HT-29大肠癌小鼠体内的肿瘤的生长,提高生存质量。2.乌芪参苓白术汤联合5-氟尿嘧啶抑制肿瘤的作用与其他组比,其肿瘤细胞的排列较规则,异型性最小,分化最好,病理性核分裂像较少。凋亡小体的数目明显多于其他组,抑制肿瘤效果最为显著。
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