人IFN-λ<,1>基因的克隆、表达及抗病毒活性的研究

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人IFN-λ1基因的克隆、表达及抗病毒活性的研究 λ1-干扰素(Interferon-λ1,IFN-λ1)是在2002年才被发现的一种新型细胞因子,即白细胞介素-29(Interleukin29,IL-29)在很广泛的组织类型中(如血液、脑、心脏、卵巢、胰腺、垂体、前列腺、睾丸)IFN-λ1虽有表达,但含量比较低。IFN-λ1与Ⅰ型干扰素一样也能诱导细胞2′,5′-OAS寡腺苷酸合成酶和MxA抗病毒蛋白基因的转录而发挥抗病毒作用,此外还能诱导细胞膜上Ⅰ类MHC抗原分子表达量的升高。本研究通过基因工程和细胞工程技术设计了一种IFN-λ1基因的体外重组和表达方案,以探索IFN-λ1基因表达和生物学功能。 第一部分 人IFN-λ1,基因的克隆 目的 探索获取IFN-λ1基因克隆的方法。方法 从经滤疱性口腔炎病毒(Vesicular stomatits Virus,VSV)诱导过的A549细胞中抽取总RNA,再用一对特异性引物进行RT-PCR(Reversetranscribed polymerase chain reaction),以扩增出足够数量的IFN-λ1基因片段,再经PCR回收试剂盒进行回收。结果 经1.2%琼脂糖电泳和DNA测序证实RT-PCR所获取的片段确实为IFN-λ1基因的全长序列(603bp)。结论 成功克隆到了IFN-λ1基因。
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