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本论文主要以橙色红曲菌pksCT基因缺失株PHDS26发酵菌丝为研究对象,对其代谢产物monascopyridine A(MPA)和monascopyridine B(MPB)进行分离和纯化,并建立了同时检测MPA和MPB的HPLC方法,具体内容如下:1:采用硅胶柱层析和半制备HPLC从菌丝体中分离、纯化了红曲菌PHDS26的两种代谢产物MPA和MPB。硅胶柱层析条件为:以200-300目的硅胶为固定相,以甲醇为提取剂,以7:3(v/v)的正己烷-乙酸乙酯为洗脱液,常压下过柱;半制备HPLC条件:色谱柱Zorbax SB-C18(9.4×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25,v/v),流速为2.5 mL/min,紫外检测波长300 nm,柱温为室温。在此条件下可得到纯度为95%的MPA和MPB。2:采用超声波辅助法提取MPA和MPB,先用单因素试验对影响两者提取含量的各因素进行研究,再设计正交实验对提取的各个参数进行优化,并进行验证实验,最后得出最佳的提取条件,即提取剂90%甲醇,提取温度40℃,提取时间10 min,料液比1:25,提取次数为2次。3:首次建立同时检测MPA和MPB的HPLC方法,色谱条件为:色谱柱Hypersil ODS-2(5μm,250×4.6 mm),流动相为乙腈-水(60:40,v/v),流速为0.8 mL/min,柱温为25℃,紫外检测波长300 nm,进样量:20μL;其中MPA的线性方程Y=33.386X+17.021,相关系数R=0.9999,线性范围0.5-200μg/mL,平均回收率99.9%,相对标准偏差为2.0%(日内)、4.8%(日间);MPB的线性方程为Y=54.691X+0.409,相关系数R=0.9997,线性范围为0.5-300μg/mL,平均回收率94%,相对标准偏差2.1%(日内)、4.6%(日间)。采用建立的HPLC方法检测了红曲菌AS3.4384及其pksCT基因缺失株PHDS26不同发酵时间的菌丝体和发酵液中MPA和MPB的含量,结果发现在PHDS26的菌丝体中检测到MPA和MPB,且在16天达到最大值,分别为2073.7μg/g和1961.7μg/g,发酵液中未检出MPA和MPB,AS3.4384的菌丝体和发酵液中均未检出MPA和MPB。