论文部分内容阅读
目的:通过对随机选入的SD大鼠采用环扎法制造大鼠脊髓损伤的模型,研究脊髓损伤后MP的使用与HSP70的表达变化规律,探究初期脊髓损伤的医治策略,为进一步学习脊髓损伤的模型打下坚实的理论基础。方法:本课题在前期工作基础上再次通过大鼠环扎法造成大鼠脊髓损伤的模型,该方法具有很强的重复性,且方法简单稳定,适合研究本课题。随机选入成年SD雄性大鼠60只,大小均为13周龄,分为三组,第一组为空白组即A组:仅行椎板减压,不作脊髓环扎处理。第二组为对照组即B组:采用环扎法进行脊髓环扎,术后6小时作脊髓减压处理;试验治疗组为C组:同B组方法一致,也行脊髓环扎处理,在环扎法术后6小时减压,但在环扎术后1小时给予大剂量MP静脉注射治疗。环扎术的关键就是充分地将研究段脊髓清晰暴露,本方法以蚊式血管钳在肉眼情况下逐步咬除胸11椎板,暴露出脊髓,使用POLYSORB 5-0白色缝合线,精确地测量出硬膜囊周长(C1),取出缝合线,通过公式(C2=C1×7.0)进行运算,得出需要的C2值,也就是硬膜囊原横截面积的70%,通过可吸收线将原测量平面上的脊髓环扎至70%。之后分别于脊髓环扎术后第一天、第三天、第七天、第十四天和第二十一天等时间段对各组大鼠分批进行处死,并取各组大鼠受损脊髓进行制作病理切片,选用HE染色、免疫组化及原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)标记法(TUNEL法)检查和采用双人盲法结合BBB评分、斜板法评价对各组结果进行统计学分析,做出相关性研究。结果:空白组A组神经运动功能BBB评分、斜板评分、HE染色均未见明显异常改变;大鼠脊髓组织中HSP70阳性细胞数比较少见。与空白组A组相比,对照组B组大鼠的神经运动功能BBB评分、斜板评分均降低,切片观察脊髓组织中HSP70阳性细胞数于术后第1天开始升高,术后第3天达到最大值,差别有统计学意义(每组之间数据比较P<0.05)。与对照组B组比较,治疗组C组大鼠的神经运动功能BBB评分、斜板评分明显增高,脊髓组织中HSP70阳性细胞数明显增加,HSP70阳性细胞数于术后第3天达到峰值,差异有统计学意义(各组之间数据比较P<0.05)。结论:1、环扎法是通过缝合线对脊髓进行持续性静态压迫而制作出大鼠急性脊髓损伤的模型,该方法的重复性良好,可定量化及可结合临床,是一种比较可靠的脊髓损伤造模方法。2、实验组与对照组之间的BBB评分、斜板评分、HSP70阳性细胞数均存在统计学差异,由此可以推论MP可增加大鼠脊髓损伤后HSP70的表达,而HSP70的作用机制为改善急性脊髓损伤后钙离子的不平衡,抑制脂质过氧化反应,避免自由基的损害,还能够增加前列腺素的合成,改善损伤脊髓的血运状况,加强脊髓组织的修复,并减少了脊髓损伤后继发性损害的发生,起到了保护神经的作用。3、脊髓损伤后,在外界因素的应激作用下,机体内HSP70表达增高,研究发现该蛋白为保护性蛋白,有保护机体脊髓神经的功效,避免脊髓的进一步损伤,对后期机体脊髓功能的恢复有一定的作用。