论文部分内容阅读
持久性有机污染物(Persistent Organic Pollutants,POPs)是指一类能够长期持续存在于自然环境中,对生态环境和人类健康存在严重潜在危害并具有生物累积性的化学物质总称。伴随着现代工业的飞速发展,人类生产和使用了大量的POPs。一部分被排放到自然环境和食物链中,随之而来产生了一系列的环境污染。快速监测以及检测环境中的少量及痕量POPs,已成为了分析化学和环境分析中一个亟待解决的课题。三(2,3-二溴丙基)异三聚氰酸酯(tris(2,3-dibromopropyl)isocyanurate,TBC)是一种典型的POPs。当前,TBC的分析测定主要依赖于高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)和液-质联用(HPLC-MS)等这类大型仪器,昂贵的使用费用、繁琐的样品前处理以及苛刻的测试条件,不适用于TBC的快速实时分析测定。因此,研究针对TBC的快速筛查和检测方法有着非常重大的意义。本文利用荧光纳米材料优异的荧光性能,构建了TBC和多巴胺的快速检测方法,可适用于TBC和多巴胺的快速检测。具体的研究内容如下:(1)第二章合成了OVA-TBC、BSA-TBC两种半抗原,将OVA-TBC作为免疫原免疫雌性BALB/c小鼠,采用体内诱生法,制备了TBC单克隆抗体。经实验证明了TBC单克隆抗体具有很高的特异性,可以应用于免疫层析试纸。(2)第三章开发了一种双读数检测TBC的侧流免疫层析法。基于来自本实验室制备的TBC单克隆抗体,采用竞争型的免疫层析方法,构建了具有颜色和荧光双读数的快速检测TBC的免疫层析试纸。在硝酸纤维素膜上(NC膜)分别固定异硫氰酸荧光素(FITC)修饰的BSA-TBC抗原和羊抗鼠二抗(lgG)作为测试线(T线)和质控线(C线),在结合垫上固定胶体金标记的TBC单克隆抗体。当待测溶液中TBC浓度高时,胶体金-单抗标记物全部与溶液中的TBC结合而不与测试线上的包被抗原结合,使T线不显示红色但有绿色荧光,C线显红色;若溶液中无目标物TBC时,胶体金-单抗标记物与T线上的包被抗原结合并淬灭FITC的荧光,使T线和C线均显示红色而T线没有绿色荧光。在经过了一系列优化试验后,确立了最佳的测试条件。在5-60μg/L的浓度范围内,T线与C线灰度的比值对TBC的浓度呈现良好的线性,检测限为5μg/L。在1-60μg/L的浓度范围内,T线的荧光强度与TBC浓度的对数呈现良好的正线性相关,检测限为1μg/L。整个分析过程可在15 min内完成。相较于可视化的颜色检测,通过引入FITC这一荧光材料可以获得更低的检测限。该方法具有较高的灵敏度和准确度,可适用于TBC的现场快速检测。(2)第四章采用一步法合成了碳量子点用于多巴胺的检测。采用乙二胺四乙酸和3-氨基苯硼酸作为C源和N源,一步水热法合成了绿色荧光的碳量子点,设计了选择性测定多巴胺的荧光分析体系。多巴胺与碳量子点结合后,基于光致电子转移(PET)原理,碳量子点作为电子的供体,多巴胺作为受体,电子从碳量子点转移到多巴胺上,从而使碳量子点的荧光发生淬灭。多巴胺浓度的增大,引起碳量子点的荧光发射峰强度减小,荧光强度与多巴胺浓度在一定范围呈良好的线性关系,基于此测定多巴胺的浓度。此分析方法检测多巴胺的线性范围为0.05-10μM,检测限可达到0.015μM。该方法花费低,简便易行,对多巴胺有着很高的选择性,并且有较高的灵敏度和精确度,在多巴胺的快速检测中有一定的应用前景。