柯萨奇病毒B心肌炎小鼠心室肌组织微小RNA1与钾通道kir2.1蛋白水平的研究

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目的观察柯萨奇病毒B(CVB)心肌炎小鼠心室肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)、dicerlmRNA、kcni2mRNA和kir2.1蛋白水平的变化,探讨这些变化的意义。方法140只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为VMC组80只和对照组60只,VMC组根据不同观察时间点随机分为7d亚组、14d亚组、28d亚组、42d亚组各20只,每个VMC亚组设置相应空白对照组各15只。VMC组每只小鼠腹腔注射CVB3 Nancy株悬液0.1ml,对照组每只小鼠腹腔注射不含病毒的RPMI1640培养基0.1ml。在建立病毒性心肌炎模型的基础上,通过HE染色观察心室肌组织病理变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测心室肌组织pri-miRNA-1、dicerl mRNA、kcni2mRNA表达水平;免疫组织化学检测心室肌组织kir2.1的表达。结果(1)VMC组小鼠心室肌均出现炎性细胞浸润、心肌坏死等不同程度的病理改变。(2)VMC组小鼠心室肌组织不同时间点pri-miRNA-1和dicerlmRNA的表达水平均明显高于对照组(P均<0.01),VMC组小鼠心室肌组织第14天pri-miRNA-1和dicerlmRNA表达水平最高。(3)VMC组小鼠心室肌组织不同时间点kcni2mRNA的表达水平明显低于对照组(P均<0.01),VMC组小鼠心室肌组织第14天kcni2mRNA表达水平最低。(4)VMC组小鼠心室肌组织不同时间点kir2.1蛋白表达水平明显低于对照组(P均<0.01),并且VMC组小鼠心室肌组织从第7天kir2.1表达水平逐渐降低。(5)VMC组小鼠心室肌组织pri-miRNA-1与dicerl mRNA表达水平明显正相关(r=0.462,P<0.01)。(6)VMC组小鼠心室肌组织pri-miRNA-1与kcni2mRNA表达水平明显负相关(r=-0.261,P<0.05),与kir2.1的表达水平明显负相关(r=-0.161,P<0.05)。结论VMC小鼠心室肌组织miRNA-1表达上调,而kcnj2基因的转录和kir2.1蛋白表达下调,推测上调的miRNA-1可能影响kcnj2基因的转录而减少kir2.1蛋白表达。
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