背景：膀胱过度活动症（Overactive Bladder，OAB）是一种以尿急症状为特征的症候群，常伴有尿频和夜尿症状，可伴或不伴有急迫性尿失禁；尿动力学上可表现为逼尿肌过度活动（detrusor instability，or detrusor overactivity，DO），也可为其他形式的尿道-膀胱功能障碍。OAB的发病机制尚不十分清楚，引发逼尿肌不稳定收缩可能是膀胱过度活动症的主要病理生理改变。逼尿肌分布着M受体，膀胱传出神经兴奋分泌乙酰胆碱作用于Ｍ受体使逼尿肌收缩，但临床上应用抗胆碱药物治疗OAB未能取得满意的疗效，因此许多学者开始探讨OAB的传入神经机制。膀胱感觉的传入神经纤维包含有髓鞘的Aδ纤维和无髓鞘的C纤维。近年来C纤维在OAB中的作用越来越受到重视。有研究表明传入性C纤维活动过度是逼尿肌反射亢进的关键病理机制。下尿路伤害性刺激后脊髓中fos蛋白表达增加。骶髓排尿中枢c-fos基因表达增多是传入性C纤维活动过度的检测指标。针刺能够抑制伤害性刺激引起的中枢神经系统fos蛋白的增加。为探讨OAB的发病机制及对不同治疗方法进行评价,已建立了许多的OAB动物模型。由于环磷酰胺诱导的OAB模型具有操作相对简单、实验条件容易控制、便于观测膀胱排尿功能变化等优点,目前应用最多。环磷酰胺诱导的OAB模型有急性、亚急性与慢性三种，亚急性模型较少应用。OAB属于慢性疾病，动物实验中采用OAB慢性模型更合理些。但如果实验的目的是以观察膀胱动力学的变化及排尿过程中神经电生理的改变为目标而不是研究OAB的其他作用机制，选择急性与慢性模型都有其合理性。但与最接近OAB病理生理变化的慢性模型相比其尿动力学变化是否有差异目前尚未见报道。针刺治疗OAB远期疗效显著，副作用小，优于目前OAB的一线治疗方法。动物实验表明：电针次髎穴能减少OAB大鼠的排尿频率，增加最大膀胱容量，抑制逼尿肌自发收缩。已有证据表明次髎穴穴下神经进入骶髓1-2节段，与盆神经进入骶髓排尿中枢的部位最近，针刺效应最强。但针刺次髎穴是否通过影响膀胱传入神经，特别是传入性C纤维活动而产生效应目前尚未明确。目的：本研究采用环磷酰胺诱导大鼠急性与慢性OAB模型，对两组尿流动力学相关参数进行比较，以便更合理选择实验动物模型。经辣椒辣素脱敏，通过电针次髎穴前后大鼠尿动力学相关参数变化的研究，探讨电针治疗OAB的传入神经机制。用分离单神经纤维的方法记录整个膀胱充盈期Aδ纤维和C纤维压力相关性神经活动，进一步探讨电针次髎穴治疗膀胱过度活动症传入机制。经电针预处理次髎穴后环磷酰胺诱导膀胱过度活动大鼠骶髓排尿中枢c-fos蛋白表达的变化，探讨电针抑制OAB的分子机制为电针次髎穴治疗膀胱过度活动症提供理论依据。方法和结果：全文共分4个部分。第一部分评价环磷酰胺诱导的急性与慢性膀胱炎模型大鼠尿流动力学的变化。将成年雌性SD大鼠3随机分成对照组,急性模型组和慢性模型组,急性模型组给与环磷酰胺200mg/kg单次腹腔注射诱导，慢性模型采用环磷酰胺75mg/kg每三天腹腔注射一次环磷酰胺，共2周4次进行诱导。成模后分别测量两组模型排尿间期，基础膀胱压，膀胱最大充盈压，最大排尿压。结果：与对照组相比，急性模型组与慢性模型组大鼠排尿间期明显缩短（P<0.05），基础膀胱压与对照组相比明显增加（P<0.01），模型组之间相比无明显差异。三组最大膀胱充盈压与最大排尿压比较无统计学意义（P>0.05）。第二部分探讨电针次髎穴对环磷酰胺诱导膀胱过度活动症大鼠尿动力学影响及传入神经机制。将成年雌性SD大鼠随机分为膀胱过度活动症模型组(OAB组),辣椒辣素组和对照组。电针次髎穴前后测量基础膀胱压、膀胱最大充盈压、最大排尿压。结果：与对照组相比，模型组大鼠排尿间期明显缩短（P<0.05），与模型组相比,辣椒辣素组灌注后排尿间期明显延长（P<0.05）；电针后模型大鼠排尿间期延长（P<0.01），而辣椒辣素组与对照组无明显变化（P>0.05，P>0.05）；OAB组大鼠基础膀胱压与对照组相比明显增加（P<0.01），电针后降低（P<0.05）；对照组电针后基础膀胱压升高（P<0.01），辣椒辣素组灌注后膀胱基础压下降（P<0.01），电针前后比较无明显变化（P>0.05）。第三部分评价电针次髎穴对环磷酰胺诱导膀胱过度活动症雌性大鼠盆神经单个传入纤维神经活动的影响。将雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠，随机分成环磷酰胺诱导的膀胱过度活动组和对照组。分离单个盆神经传入纤维,根据不同神经传导速度（conduction velocities，CV）区分Aδ纤维和C纤维。测定神经纤维机械敏感性特征，观察OAB组大鼠电针前后传入神经活动的变化。结果：与对照组相比OAB大鼠模型排尿间期缩短，膀胱基础压升高（p<0.01）。OAB模型大鼠中共分离出32个盆神经传出神经独立单位，包括14条Aδ纤维和18条C纤维，平均神经CV分别为5.32±3.16m/s和1.28±0.28m/s,对照组大鼠共分离出个24个传出神经独立单位，包括8条Aδ纤维和16条C纤维，平均神经CV分别为6.82±3.16m/s和1.45±0.18m/s。电针OAB模型组大鼠次中髎穴20～60分钟，传入C纤维尖峰出现率明显下降（P<0.05）。Aδ纤维压力相关神经活动电针前后无明显变化(P>0.05)。第四部分观察电针次髎穴前后骶髓排尿中枢c-fos蛋白异常表达，探讨电针抑制急性膀胱过度活动症的分子机制。SD大鼠体重随机分成对照组、模型组和电针组。模型组和电针组共32只大鼠腹腔注射环磷酰胺（200mg/kg）诱导OAB模型，对照组腹腔内注射等剂量生理盐水。电针组造模前5天电针预处理次髎穴,每天一次,共5次。取三组大鼠L6脊髓节段，应用免疫组化方法定量观察fos蛋白阳性的神经元细胞的数量。结果：与对照组相比，模型组排尿间期缩短（P<0.01），基础膀胱压明显升高（P<0.01）；与模型组相比，电针组排尿间期延长（P<0.05），基础膀胱压下降（P<0.05）。模型组L6脊髓节段fos蛋白阳性的神经元细胞数量较对照组明显增加（P<0.01），电针预处理后明显减少（P<0.01）。结论:1.环磷酰胺诱导的急慢性OAB模型用于尿动力学评估具有同样可信性。2.电针次髎穴能抑制环磷酰胺诱导大鼠膀胱过度活动，可能与抑制辣椒辣素敏感的C纤维活性有关。3.环磷酰胺诱导的OAB大鼠传入神经C纤维活动明显增加，电针次髎穴后C纤维活动明显减少，提示针刺的作用机制可能与作用于感受伤害的传入神经介导的C纤维有关。4.电针次髎穴能够减少c-fos基因的表达,抑制脊髓反射通路传入神经C纤维的活动抑制膀胱过度活动。