流感病毒具有易变异、易重组的特点,被认为是人类面临的最持久和最重要的威胁之一,历史上四次流感大流行均是由流感病毒的重配株或是变异株引起的。目前H5N1高致病性禽流感病毒所导致的高病死率所引发的公共卫生问题更是引起了国际社会的高度重视,及时、准确的发现病毒已成为有效防控人禽流感疫情的前提,因此本文的研究目的就是根据目前禽流感防控形势的需要,建立针对多种常见流感病毒和人禽流感病毒的快速、准确、高通量的基因芯片检测技术平台,为临床鉴别、诊断及防生反恐等提供快速、有效的检测手段。本文选取H1N1、H3N2和B型三种常见季节性流感病毒以及H5N1、H9N2两种人感染禽流感病毒作为检测靶病毒。以血凝素基因、神经氨酸酶基因、核蛋白基因作为检测靶基因,设计和筛选亚型特异性探针和致病力鉴别探针。比较单引物扩增、随机引物扩增、体外转录三种RNA扩增方法的扩增效率,确定样品处理方法。在此基础上,确定此基因芯片检测体系的Cutoff值,评价方法的特异性、灵敏性、重复性及符合率等技术指标。结果表明,此基因芯片能够特异的检测到5种靶病毒,并且5种病毒之间无交叉反应。对H1N1、H3N2、H5N1、H9N2亚型及B型流感病毒检测敏感性分别为8HAU、16HAU、4HAU、8HAU和32HAU,高致病力鉴别探针敏感性为32HAU。同时此检测芯片具有良好的重复性。对56例流感样病例样本进行检测,与常规RT-PCR法比较,符合率达到83.9%(47/56),其中阳性符合率为82.7%(43/52)。本研究建立的流感病毒基因芯片检测技术能够鉴别、检测常见的5种流感病毒,并且可以对病毒的致病力进行检测。该检测技术重复性好、特异性好、敏感性较高,适应大规模、高通量和平行检测的要求,有效解决了现有检测技术不能一次试验同时检测多种亚型流感病毒的问题。为应对紧急突发事件提供了一种重要的技术手段。