MicroRNA-217表达水平与胃癌肿瘤生物学特性分析

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haohaojc
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目前,胃癌在因癌症引发的死亡率中排名第二,在男性中的死亡率仅次于支气管肺癌,在女性中的死亡率排名第四。近三分之二的胃癌病例发生在发展中国家,42%发生在中国。胃癌的发生是多因素作用下的多阶段过程,例如癌基因激活、抑制基因失活,免疫改变、表观遗传改变等。即使在接受根治性手术和辅助化疗之后,晚期胃癌患者的病情仍常有恶化,导致治疗失败和高死亡率。因此,急需发现可无创检测出早期胃癌患者的生物标志物。MicroRNAs (miRNA)是~22个核苷酸组成的非编码RNAs,其可参与转录后调控且调控着多种重要的病理生理过程。MiRNA可在多种生物过程的调节中发挥重要作用,包括细胞增殖、凋亡、迁移和分化。异常表达的miRNA与多种疾病有关,包括癌症。既往研究显示,miRNA在胃癌中可扮演抑癌基因或致癌基因的角色。截至目前,有关microRNA-217参与多种肿瘤发生发展的报道很多,但是有关microRNA-217在胃癌中的研究甚少。[目的]探讨microRNA-217在胃癌中的表达水平及其对胃癌发生发展的影响。[方法](1)采用real-time PCR检测50例胃癌组织和癌旁正常组织microRNA-217的表达水平,并进一步分析microRNA-217表达水平与临床病理特征之间的相关性。(2)采用Northern杂交检测胃癌上皮细胞株(SGC-7901、HGC-27、MGC-803、MKN-45)和正常胃黏膜永生化细胞株(GES-1)中microRNA-217的表达水平。(3)采用 real-time PCR检测胃癌上皮细胞株(SGC-7901、HGC-27、MGC-803、MKN-45)和正常胃黏膜永生化细胞株(GES-1)中microRNA-217的表达水平。(4)用microRNA-217模拟物和microRNA-217抑制剂分别转染胃癌上皮细胞株HGC-27后,使用real-timePCR检测其表达水平,表达成功后使用CCK-8试剂盒检测microRNA-217对细胞增殖的影响。(5)应用细胞迁移和侵袭实验技术评估microRNA-217对细胞转移和侵袭能力的影响。[结果](1)相较于癌旁正常组织,microRNA-217的表达水平在胃癌组织中明显下调;并且microRNA-217的表达水平与TNM分期有关。(2) Northern杂交检测结果显示,microRNA-217在胃癌上皮细胞株(SGC-7901、HGC-27、MGC-803、MKN-45)中的表达水平明显低于正常胃黏膜永生化细胞株(GES-1)中的表达水平。(3) Real-time PCR 检测结果显示,microRNA-217 在胃癌细胞株(SGC-7901、HGC-27、MGC-803、MKN-45)中的表达水平明显低于正常胃黏膜永生化细胞株(GES-1)中的表达水平。(4)在胃癌细胞株HGC-27中转染microRNA-217 mimic后,其增殖率显著降低;在胃癌细胞株HGC-27中转染microRNA-217 inhibitor后,其增殖率显著增加。(5)在胃癌细胞株HGC-27中转染microRNA-217 mimic后,其侵袭和转移能力显著降低;在胃癌细胞株HGC-27中转染microRNA-217 inhibitor后,其侵袭和转移能力显著增加。[结论](1) MicroRNA-217在胃癌组织和细胞中的表达水平明显低于癌旁正常组织和细胞中的表达水平。(2) MicroRNA-217表达水平与TNM分期呈负相关。(3)过表达microRNA-217可抑制胃癌细胞增殖、侵袭和转移的能力。
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