背景：　　表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶（tyrosine kinase，TK）抑制剂已被广泛用于非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗，如厄洛替尼（Erlotinib）、吉非替尼（Gefitinib）等。EGFR-TKI在 NSCLC的治疗上取得了非常好的效果，特别是在具有EGFR基因突变的NSCLC，几乎所有的患者在EGFR-TKI治疗一年左右后都会发生耐药现象，严重影响了EGFR-TKI的治疗疗效。研究表明，组蛋白去乙酰化酶（Histone Deacetylases inhibitor；HDACI）能够抑制编码如细胞周期抑制、分化、凋亡等相关因子的表达。此外HDACs还可以促进与细胞侵袭和迁移和血管生成相关基因的表达。因此，HDACs在肿瘤的发生、发展中起重要作用。组蛋白去乙酰化酶（Histone Deacetylases；HDAC）抑制剂可以通过改变组蛋白及非组蛋白的乙酰化水平，从而影响基因转录。HDACIs在血液系统肿瘤，以及实体肿瘤的研究中，取得了比较理想的结果。同时研究表明，HDACIs在与放疗以及其他抗肿瘤药物的联合作用中，显示出较强的协同及增强作用。伏立诺他（SAHA）是一种广谱的HDACIs，是第一个被FDA批准用于T细胞淋巴瘤的治疗。本研究通过体外诱导Erlotinib耐药细胞株PC-9/ER，检测其与亲代Erlotinib敏感型细胞PC-9中PTEN表达的差异，结果表明，在PC-9/ER耐药性的形成过程中，PTEN的表达受到抑制。提示PTEN在耐药性的形成过程中起一定的作用。　　目的：　　检测SAHA对PC-9/ER细胞的增殖、凋亡及其耐药性的影响。　　方法：　　1.通过体外诱导耐药的方法诱导 PC-9（Erlotinib敏感型）细胞耐药。开始以10nmol/L Erlotinib培养PC-9细胞48h，弃去旧培养基以及无菌PBS清洗3遍，在无 Erlotinib的环境下培养直至细胞生长至80%~90%汇合度时，逐渐升高的Erlotinib的浓度继续培养，直至PC-9细胞能正常生在在含1μmol/L的Erlotinib环境中。　　2.MTT法检测PC-9，PC-9/ER对Erlotinib的敏感性。　　3.MTT法检测SAHA单药、Erlotinib单药，以及无毒剂量的SAHA（1μmol/L）联合Erlotinib处理后，PC-9/ER细胞株的增殖抑制情况。　　4.应用FCM（Flow Cytometry，流式细胞术），Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测SAHA单药、Erlotinib单药，以及无毒剂量的SAHA（1μmol/L）联合Erlotinib处理后，PC-9/ER细胞株的凋亡情况。　　5.应用WB（Western Blot）法检测PC-9与PC-9/ER细胞中PTEN表达情况。　　6.应用WB（Western Blot）法检测SAHA单药、Erlotinib单药，以及无毒剂量的SAHA（1μmol/L）联合Erlotinib处理后，PC-9/ER细胞株中PTEN表达的差异。　　结果：　　1.体外诱导耐药细胞株PC-9/ER对Erlotinib的敏感性明显低于PC-9细胞。其耐药倍数＞100，说明耐Erlotinib细胞株的建立是成功的。　　2.SAHA单药能抑制PC-9/ER的增殖，在无毒计量（1μmol/L）的SAHA与Erlotinib联合作用于PC-9/ER细胞时，能部分逆转PC-9/ER的耐药性，其逆转倍数为3.01，相对逆转率为66.8%。　　3.SAHA单药即可促进PC-9/ER细胞的凋亡，在无毒剂量（1μmol/L）与Erlotinib联合，更能进一步提高PC-9/ER细胞的凋亡率。　　4.WB（Western Blot）检测PC-9/ER及PC-9细胞中PTEN的表达情况，结果显示PC-9/ER中PTEN的表达明显下调。　　5.WB检测经药物处理后的 PTEN表达情况，SAHA及 SAHA+Erlotinib处理后48H后，PTEN的表达升高，与Erlotinib组及空白组相比，P＜0.05。　　结论：　　1.组蛋白去乙酰化酶抑制SAHA能够部分改善Erlotinib耐药细胞株PC-9/ER的耐药性；　　2.SAHA能促进PC-9/ER细胞的凋亡；　　3.PTEN的缺失在Erlotinib耐药的产生中起一定的作用；　　4. SAHA能够提高PTEN的表达，促进细胞凋亡，来改善Erlotinib的耐药性。