论文部分内容阅读
目的：通过对PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome10即第10号染色体缺失的与张力蛋白同源的基因)在正常脑组织以及人脑胶质瘤中采用反转录PCR法(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)和免疫组化法(S-P法)分别在基因、分子及组织水平进行分析，进一步探讨PTEN与胶质瘤恶性程度之间的关系，为胶质瘤的诊断和治疗提供理论和实验依据。方法：收集河北大学附属医院神经外科2010年2月～2012年01月胶质瘤病人住院行手术治疗的病理标本38例，同时收集了10例颅脑外伤行内减压术的正常的脑组织标本。所有胶质瘤及正常脑组织标本未经生理盐水浸泡，采集后立即置液氮10min,后转-80℃冰箱长期冻存备用。所有病理标本按最新的WHO星型胶质瘤分级标准分级，Ⅰ级4例,Ⅱ级13例，Ⅲ级15例,Ⅳ级6例,其中Ⅱ级以下划为低级别组,Ⅲ级^Ⅳ级为高级别组;所有肿瘤标本及病理级别均经由河北大学附属医院病理实验室诊断证实。本研究通过采用反转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学(S-P法)方法分别检测PTEN mRNA及其蛋白产物在人脑胶质瘤及正常脑组织中的表达情况。结果：免疫组织化学实验：正常脑组织阳性表达率为100%；高级别组阳性病例16例，阳性表达率35.29%；低级别组阳性病例6例，阳性表达率76.19%；免疫印迹实验：低级别组蛋白表达量为0.579±0.192，高级别组蛋白表达量为0.197±0.069；反转录PCR实验：低级别组mRNA表达量为2.997±0.593，高级别组mRNA表达量为1.237±0.253；以上实验证实PTEN在基因、分子和组织水平表达一致，在正常脑组织中的表达高于胶质瘤，且不同恶性程度的胶质瘤之间PTEN表达量也不相同，且随着胶质瘤级别的增高,PTEN的表达量逐渐下降。PTEN在正常脑组织与不同恶性程度的胶质瘤之间以及不同恶性程度的胶质瘤之间的表达差异经统计学分析有统计学意义(P<0.01)。结论：本课题在人脑胶质瘤及正常脑组织中同时应用三种试验方法分别在基因、蛋白和组织水平检测了PTEN的表达情况并分析了PTEN及其表达产物与胶质瘤级别的相关性。研究发现，PTEN在正常人脑组织中呈强阳性表达，主要表达于细胞核;不同级别的胶质瘤PTEN的表达阳性率各不相同，随着胶质瘤病理级别的升高，PTEN的阳性表达率呈明显下降趋势，这表明PTEN的表达阳性率与胶质瘤的病理级别呈负相关性，且病理级别越高的胶质瘤病人PTEN的表达量越少，其可能是影响脑胶质瘤病人发生发展及其预后判断的潜在性重要生物学指标，有望成为胶质瘤病人治疗的新方向。