目的：目前研究表明FOXO3a转录因子与细胞凋亡相关，同时As2O3具有促进肿瘤细胞凋亡的作用，但是具体机制尚待进一步研究。本实验通过干扰FOXO3a因子的表达，研究As2O3药物作用前后，SW620细胞凋亡情况以及FOXO3a和凋亡相关因子Bcl-2、BAX，FOXO3a和干细胞表面标记物CD133、OCT4表达之间的关系，分析探讨FOXO3a在As2O3促进大肠癌SW620细胞凋亡以及影响干细胞标记物表达中的作用，阐明As2O3促进大肠癌细胞凋亡的分子机制。　　方法：以人大肠癌SW620细胞为实验对象，利用siRNA瞬时转染干扰以及PI3K抑制剂LY294002药物激动的方法改变FOXO3a的表达，模拟FOXO3a异常表达的情况后再给予As2O3药物处理，对照药物作用前后各指标差异。按照上述处理，将实验分为以下六组:空白对照组，4μmol/L As2O3药物组，FOXO3asiRNA组，FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，50μmol/LLY294002药物组，50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组。利用Hoechst33258染色试剂盒和流式细胞术检测SW620细胞凋亡情况，利用Western blot、免疫细胞化学和RT-PCR等方法分别在蛋白和mRNA水平检测不同处理情况下，FOXO3a、BAX、Bcl-2以及CD133、OCT4因子的表达变化。　　结果：第一部分:1.Hoechst33258染色试剂盒凋亡检测结果显示:(1)与空白对照组（0.12±0.01）相比，4μmol/L As2O3药物组（1.50±0.10）、50μmol/LLY294002药物组（3.13±0.21）、50μmol/L LY294002+4μμmol/L As2O3药物组（3.14±0.06），大肠癌SW620细胞凋亡率增加(P＜0.05)(2)与FOXO3a siRNA组相比，FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组大肠癌SW620细胞凋亡率无差异(P＞0.05)。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，大肠癌SW620细胞凋亡率降低（P＜0.05）;4μmol/L As2O3药物组，50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，大肠癌SW620细胞凋亡率无差异(P＞0.05)02.流式细胞术凋亡检测结果显示，(1)与空白对照组（2.43±0.16）相比，4μmol/L As2O3药物组(4.62±0.36)、50μmol/LLY294002药物组（4.79±0.21）、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组（3.35±0.57），大肠癌SW620细胞凋亡率增加(P＜0.05); FOXO3a siRNA组(1.51±0.12), FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组（1.44±0.15）大肠癌SW620细胞凋亡率降低（P＜0.05）。(2)与FOXO3a siRNA组相比，空白对照组、4μmol/LAs2O3药物组、50μmol/L LY294002药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，大肠癌SW620细胞凋亡率增高(P＜0.05); FOXO3a siRNA+4μmol/LAs2O3组，大肠癌SW620细胞凋亡率无差异(P＞0.05)。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，大肠癌SW620细胞凋亡率降低(P＜0.05);4μmol/L As2O3药物组，50μmol/LLY294002+4μmol/L As2O3药物组，大肠癌SW620细胞凋亡率无差异(P＞0.05)。3.RT-PCR mRNA定量检测结果显示:(1)4μmol/L As2O3药物组较空白对照组，FOXO3a mRNA、 BAX mRNA表达明显增高，Bcl-2 mRNA表达明显降低(P＜0.05)。(2)与FOXO3a siRNA组相比，空白对照组、4μmol/L As2O3药物组、50μmol/L LY294002药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a mRNA、 BAX mRNA表达增高(P＜0.05), Bcl-2 mRNA表达降低(P＜0.05); FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a mRNA、 BAX mRNA、Bcl-2 mRNA表达均无差异(P＞0.05)。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3amRNA、 BAX mRNA表达降低，Bcl-2 mRNA表达增高(P＜0.05);4μmol/L As2O3药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a mRNA、 BAXmRNA、 Bcl-2 mRNA表达无差异(P＞0.05)。4.Western blot蛋白定量结果显示:(1)4μmol/L As2O3药物组较空白对照组，FOXO3a、BAX蛋白表达增高，Bcl-2蛋白表达降低（P＜0.05）。(2)与FOXO3a siRNA组相比，空白对照组、4μmol/LAs2O3药物组、50μmol/L LY294002药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a、BAX蛋白表达增高(P＜0.05)，Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05);FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a、BAX、Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a、BAX蛋白表达降低，Bcl-2蛋白表达增高(P＜0.05);4μmol/L As2O3组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a、BAX、Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。5.免疫细胞化学蛋白定量检测结果显示:FOXO3a为胞核和胞浆染成棕黄色，BAX为胞浆和胞膜染成棕黄色，Bcl-2为胞浆和核膜染成棕黄色。各组染色结果与Western blot蛋白定量结果相符。　　第二部分:1.RT-PCR mRNA定量检测结果显示:(1)4μmol/L As2O3药物组较空白对照组，FOXO3a mRNA表达增高，CD133、OCT4 mRNA表达降低(P＜0.05)。(2)与FOXO3a siRNA组相比，空白对照组、4μmol/L As2O3药物组、50μmol/L LY294002药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a mRNA表达增高(P＜0.05)，CD133、OCT4 mRNA表达降低(P＜0.05);FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a、 CD133、OCT4 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a mRNA表达降低，CD133、OCT4 mRNA表达增高(P＜0.05);4μmol/L As2O3药物组、50μmol/LLY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a、CD133、OCT4 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05)。2.Western blot蛋白定量结果显示:(1)4μmol/L As2O3药物组较空白对照组，FOXO3a蛋白表达增高，CD133、OCT4蛋白表达降低（P＜0.05）。(2)与FOXO3a siRNA组相比，空白对照组、4μmol/L As2O3药物组、50μmol/L LY294002药物组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a蛋白表达增高（P＜0.05），CD133、OCT4蛋白表达降低（P＜0.05）;FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a、CD133、OCT4蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）。(3)与50μmol/L LY294002药物组相比，空白对照组、FOXO3a siRNA组、FOXO3a siRNA+4μmol/L As2O3组，FOXO3a蛋白表达降低，CD133、OCT4蛋白表达增高（P＜0.05）;4μmol/L As2O3组、50μmol/L LY294002+4μmol/L As2O3药物组，FOXO3a、CD133、OCT4蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。　　结论：1.As2O3可以促进大肠癌SW620细胞凋亡，其机制可能与上调FOXO3a因子表达相关;2.As2O3可以下调干细胞标记物CD133和OCT4的表达，其机制可能与上调FOXO3a因子表达相关;3.综合考虑，As2O3可能通过FOXO3a因子促进大肠癌SW620细胞凋亡，具体机制可能与影响干细胞标记物CD133和OCT4表达相关。