芒果黄酮的提取分离及抗氧化活性的研究

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为了充分开发利用芒果,本实验主要以芒果果肉为原料,利用正交实验确立芒果中黄酮类化合物的最佳提取方法及条件,通过大孔树脂以及聚酰胺树脂对芒果黄酮粗提物进行分离纯化,采用HPLC对各个提取分离阶段芒果黄酮中的芒果苷含量进行分析。并在此基础上对不同品种的芒果黄酮粗提物、同一品种芒果的不同提取分离阶段的组分进行了抗氧化作用的初步研究,主要研究结果如下:1.分别探究了浸渍法、乙醇加热回流法、超声波提取法从芒果中提取黄酮类物质的工艺条件。其中乙醇加热回流法的最佳提取条件:60%乙醇水溶液,提取时间1.5h,提取温度70℃,料液比1:10,此条件下芒果黄酮得率为1.91%;浸渍法的最佳提取条件:60%乙醇水溶液,浸渍时间6h,料液比1:20,此条件下芒果黄酮得率为1.52%;超声波提取法的最佳提取条件:60%乙醇水溶液,超声次数3次,每次25min,料液比1:15,此条件下芒果黄酮得率为1.73%,与浸渍法和超声波提取法相比,乙醇加热回流法提取效率较高,且有助于后续过滤操作。2.采用AB-8大孔树脂对上一阶段的芒果黄酮粗提物进行初步分离纯化,并进行动态吸附、洗脱实验,得到最佳动态吸附条件:上柱浓度为5.0mg/ml,上柱速率为2.0BV/h,最佳洗脱条件:洗脱溶液为60%乙醇溶液,洗脱速度为1.0BV/h,洗脱体积为5.0BV。通过AB-8大孔树脂初步纯化结合聚酰胺树脂进一步分离,经测定,芒果粗提物经大孔树脂、聚酰胺树脂进一步分离纯化后,制备样品中的黄酮含量有较大提高,粗提物、大孔树脂初步纯化物、聚酰胺70%乙醇洗脱组分的黄酮含量分别为255.5mg/g、752.0mg/g、941.0mg/g,利用HPLC对不同提取分离阶段样品中的芒果苷含量进行测定,结果表明经过分离纯化后,芒果苷有了较好的富集,其中70%乙醇洗脱组分含量最高,达到45.98%。3.芒果黄酮的抗氧化作用的研究结果表明,台农芒果、象牙芒果、金煌芒果中的黄酮类物质都具有良好的抗氧化活性,对于羟自由基,清除能力从大到小依次为:台农芒果,象牙芒果,金煌芒果,VC;对于超氧阴离子自由基,清除能力从大到小依次为:VC,台农芒果,象牙芒果,金煌芒果;对于DPPH,清除能力从大到小依次为:VC,台农芒果,金煌芒果,象牙芒果;对于脂质过氧化抑制作用,抑制率从大到小依次为:台农芒果,象牙芒果,金煌芒果,VC。不同提取分离阶段的芒果黄酮抗氧化性差别较大,其中经聚酰胺树脂70%乙醇溶液洗脱的组分抗氧化活性最高,高于芒果初步纯化物和粗提物,而30%组分抗氧化作用较弱,表明芒果黄酮经过分离纯化后,具有抗氧化活性的有效成分得到了良好的分离与富集。
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