炙甘草液相指纹图谱研究

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甘草(Licorice)是豆科(Leguminosae)甘草属(Glycyrrhiza)植物甘草(Glycyrrhiza ulalensis Fisch)、胀果甘草(Glycyrrhizainflata Bat),或光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)的干燥根及根茎加工而成。始载于《神农本草经》,素有“国老”之称,性甘,味平,归心、肺、脾、胃经,具有和中缓急,润肺,解毒,调和诸药的功效。为解决目前甘草饮片质量评价指标单一,科学性不高;炙甘草质量差,稳定性低、缺乏质量评价指标等实际问题。本实验应用了全国各地、不同等级、不同采收期的正品甘草,利用HPLC建立起了生甘草及蜜甘草的指纹图谱。同时建立了甘草酸和甘草苷同时定量的HPLC检测方法;优选了烘制法、微波加热法代替传统炒制法的蜜制工艺。1.应用HPLC建立了对甘草中的甘草苷和甘草酸进行同时定量检测的方法,二者分离度良好,回归方程相关系数具达到0.9999以上。2.以甘草苷和甘草酸的加权含量作为评价指标,应用均匀设计法,确定了指纹图谱最佳前提取条件为50%的甲醇,冷浸10小时,超声30分钟。3.在收集17种各类样本后,建立了生甘草的液相指纹图谱,所建立指纹图谱整体分离度良好,方法的重现性、稳定性,以及各样本非公有峰比例、保留时间RSD值,都符合指纹图谱的要求。4.在严格按照炒制蜜甘草的工艺的基础上,炒制不同等级的10批蜜甘草,并建立起了蜜甘草的指纹图谱。5.通过正交工艺优选了烘制法的炮制工艺,确定最佳的工艺为加25%的炼蜜(炼蜜中加30%的水),闷润30h,90度烘制4小时,在此工艺下可得到和炒制法建立起的炙甘草指纹图谱相似度最高的样品,且方法重现性明显优于炒制法。6.通过正交工艺优选了微波加热法的炮制工艺,确定最佳的工艺为加25%的炼蜜(炼蜜中加30%的水),闷润30h,40%档次微波加热6分钟,在此工艺下可得到和炒制法建立起的炙甘草指纹图谱相似度最高的样品,且方法重现性明显优于炒制法,也较烘制法为佳。
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