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目的:探讨乳腺癌Ⅳ期患者血清中抗MUC1抗体的亲和性,为明确乳腺癌Ⅳ期血清抗MUC1抗体与MUC1抗原的结合反应机制提供依据。方法:1、Western Blot及阻断实验:用重组蛋白8R-MUCPT作为固相抗原检测乳腺癌Ⅳ期患者血清中的抗MUC1抗体,同时分别用鼠抗人MUC1 VNTR单克隆抗体和鼠抗人乙型肝炎表面抗原单克隆抗体作为阻断剂对抗原抗体反应进行阻断;2、间接ELISA抑制实验:随机从早期组(非Ⅳ期)和晚期组(Ⅳ期)乳腺癌患者中选取抗MUC1抗体阳性的血清样本各11份,用重组8R-MUCPT抗原分别检测所有血清样本中的抗MUC1抗体,并且每份样本分别用相同摩尔数的8R-MUCPT、非8R-MUC1重组蛋白3a B、多聚精氨酸(Poly R)、多聚组氨酸(Poly H)作为阻断剂进行实验,并计算抑制率;3、尿素变性结合酶联免疫吸附实验:用尿素作为变性剂以间接ELISA法检测早期组61例和晚期组64例乳腺癌患者血清样品中抗MUC1抗体,并计算亲和力指数。4、统计分析:数据分析使用SPSS 17.0,两组样本抑制率和亲和力指数的差异分析使用t检验,检验水准按P<0.05认定有统计学差异。结果:1、Western Blot及阻断实验表明重组8R-MUCPT蛋白可以被IV期乳腺癌患者血清中的天然抗MUC1抗体识别,并且可以被鼠抗人MUC1单克隆抗体所阻断,同时不能被抗乙型肝炎表面抗原单克隆抗体所阻断,证实乳腺癌IV期患者血清抗MUC1抗体可以与MUC1抗原结合;2、间接ELISA抑制实验表明乳腺癌患者血清中的抗MUC1抗体不被8R-MUCPT中的非MUC1抗原之外的成分所阻断,仅与MUC1抗原发生了特异性结合,并且早期和晚期两实验组单个样本的抑制率均超过了45%,两组间样本的抑制率没有统计学差异(P=0.778);3、尿素变性结合酶联免疫吸附实验发现晚期组乳腺癌患者与早期组相比,二组血清抗MUC1抗体的亲和力指数没有统计学差异(47.13±11.45 vs.47.53±16.10,P=0.873)。结论:乳腺癌Ⅳ期患者血清中的抗MUC1抗体可以特异性的与MUC1抗原相结合;乳腺癌Ⅳ期患者血清中抗MUC1抗体的亲和性与非Ⅳ期患者比较没有明显差异。