论文部分内容阅读
目的:应用GenoType MTBDRplus方法和传统比例法,对结核分枝杆菌利福平耐药性进行检测研究对比。GenoType MTBDRplus方法采用核酸反向线性探针杂交技术检测与利福平耐药密切相关的rpoB基因,可在24小时内完成检测。传统比例法需要3个月左右完成检测,虽然方法简单、经济、易于推广,难于满足临床对结核病诊断和治疗的需求,限制了其临床的应用。GenoType MTBDRplus方法为早期诊断耐药结核病提供快速检测依据,利于临床早期合理治疗。方法:标本来自于2011年4月至2011年9月,天津市滨海新区结核病防治所就诊涂片阳性患者的痰标本,共收集55例患者的痰标本。同一份痰标本分别进行GenoType MTBDRplus方法和传统比例法检测,检测结核分枝杆菌对利福平耐药性。GenoType MTBDRplus方法采用核酸反向线性探针杂交技术检测与利福平耐药密切相关的rpoB基因,推测其对利福平的耐药性。GenoType MTBDRplus方法检测过程包括,涂阳痰标本的处理通过碱处理-中和离心沉淀法,使用GenoLyse试剂盒提取DNA,PCR扩增,杂交,结果判读完成。传统比例法检测结核分枝杆菌利福平耐药性,通过实验材料准备,制备菌悬液和稀释,接种菌液和培养,结果报告完成。应用Kappa检验对两种方法进行一致性的统计分析。研究在天津市结核病控制中心参比室进行。结果:1.55例涂阳标本中,1例经鉴定为非结核分枝杆菌(NTM),1例培养结果为污染,1例培养阳性而GenoType MTBDRplus无法判读。可与比例法药物敏感性试验进行对比的标本为52例。2.利福平耐药性的结果。以比例法药敏结果为判断标准,使用GenoType MTBDRpuls检测利福平耐药性的敏感度为75%,特异度为97.9%,阳性预测值为75%,阴性预测值为97.9%,总一致率为96.2%。对两种方法进行一致性Kappa检验,K=0.729(P<0.01)。结论:GenoType MTBDRplus方法检测结核分枝杆菌对利福平的耐药性,与传统比例法检测比较其敏感度和特异度,具有较高的一致性。但其较传统比例法快速,为临床早期诊断耐药结核病提供快速检测依据,利于临床早期合理治疗。