鹿角脱盘作为可再生的生物资源,已有2000多年的用药历史,具有产量大容易获得等优点,且抗肿瘤作用明确,但其抗肿瘤有效部位不清,作用机制不明;骨化程度高,质地坚硬不宜直接使用,极大限制了鹿角脱盘的开发利用;传统加工多以水煎煮法为主,方法单一,对鹿角脱盘加工方法和抗肿瘤作用的研究已势在必行。本实验,首先,利用酸、碱、盐、醇和水5种具有代表性的溶液对鹿角脱盘进行提取,优化得到最佳工艺参数。其次,采用柱前衍生RP-HPLC法对5种提取物的21种氨基酸组成以及含量进行比较分析,初步探索其抗肿瘤作用物质基础。最后,采用肝癌H22荷瘤小鼠模型比较5种提取物中抗肝癌活性,初步筛选抗肝癌活性部位;从免疫学角度阐释作用机制。实验结果如下:1、鹿角脱盘酸溶液、碱溶液、盐液液、醇溶液及水溶液提取物最佳工艺参数分别为:提取温度90℃、提取时间130min、料液比1:25;提取温度90℃、提取时间130min、料液比1:20;提取温度80℃、提取时间130min、料液比1:25;提取温度70℃、提取时间150min、料液比1:25;提取温度100℃、提取时间130min、料液比1:26。鹿角脱盘5种不同提取物提取率由大到小排列顺序为:酸提取物﹥碱提取物﹥水提取物﹥盐提取物﹥醇提取物,其中盐提取物和醇提取物提取率差异不具有统计学意义(P﹥0.05)。2、鹿角脱盘及其5种提取物中9种药用氨基酸占总氨基酸的比例均在60%以上,其中,碱提取物中Tyr、Leu、Lys、Asp、Phe、Met和Glu 7种氨基酸含量最高(P﹤0.05);水提取物中Asp、Gly、Met、Glu和Arg 5种氨基酸含量最高(P﹤0.05);醇提取物中Gly、Arg、Phe、Met和Glu 5种氨基酸含量最高(P﹤0.05);鹿角脱盘碱提取物的E/T值和E/N值高于同类型的阿胶以及海参胶原。鹿角脱盘5种提取物氨基酸含量由高到低依次为:水提取物﹥碱提取物﹥醇提取物﹥酸提取物﹥盐提取物﹥鹿角脱盘超微粉,其中水提取物、碱提取物和醇提取物差异不显著(P﹥0.05)。3、相较模型组,鹿角脱盘及其5种提取物均能显著抑制肿瘤生长促进肿瘤细胞凋亡(P﹤0.05);保护脾脏组织结构,诱导肿瘤组织坏死;提高免疫器官指数和脾淋巴细胞刺激指数(P﹤0.05);提高脾脏和外周血中CD4+/CD8+比值(P﹤0.05),提高血清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ的含量(P﹤0.05),同时降低免疫抑制细胞因子TGF-β的含量(P﹤0.05),提高肝癌H22荷瘤小鼠的细胞免疫水平;提高血清中三种免疫球蛋白IgE、IgG、IgM的含量(P﹤0.05),提高荷瘤小鼠体液免疫水平。不同提取物抗肿瘤作用不同,其中碱提取物效果最好。