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目的:分析异基因造血干细胞移植(hematopoietic stem celltransplantation，allo-HSCT)患者移植后不同时期各免疫细胞亚群的数量变化及其临床意义。 方法: 1、选择2013年7月至2014年12月河北医科大学第二医院血液内科移植病房进行清髓性异基因造血干细胞移植的21例患者作为研究对象。 2、患者临床情况包括:①年龄:中位年龄35岁（13-57岁）;男性12例，女性9例。②疾病诊断及分期:急性髓系白血病(AML)8例，其中第1次完全缓解(CR1)期6例，第2次完全缓解（CR2）期2例。急性淋巴细胞白血病(ALL)6例，其中CR1期5例，CR2期1例。骨髓增生异常综合征(MDS)共5例，均为难治性血细胞减少伴原始细胞增多亚型（MDS-RAEB），国际预后积分系统(IPSS)分期:中危-1期1例，中危-2期4例。淋巴瘤白血病1例，重型再生障碍性贫血(SAA)1例。观察时间（移植后1个月-12个月）。③供受者人类白细胞抗原(HumanLeukocyte Antigen，HLA)配型:HLA10/10相和非血缘相关供者(MUD)移植2例，HLA10/10相合同胞供者(MSD)移植10例，HLA5/10-7/10相合亲缘供者移植(haplo-HSCT)9例。④移植方式:非血缘供者采用外周干细胞，亲缘供者采用骨髓+外周干细胞。⑤对照组:造血干细胞健康供者7例。 3、标本采集:患者移植后满+1、2、3、4.5、6、9、12个月采取患者外周血4ml，EDTA抗凝;对照组在干细胞动员前同样方式采血。 4、流式细胞术（flow cytometry，FCM;美国BD公司FACSCantoll流式细胞仪）检测各亚群免疫细胞数量变化。抗体组合:T细胞:CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+FoxP3+;B细胞:CD19+、自然杀伤(NK)细胞: CD16+CD56+;树突状细胞(DC): CD123-CD11c+(髓样树突状细胞(mDC))，CD123+CD11c-(浆细胞样树突状细胞(pDC))。 5、统计学:计量资料的组间比较应用两独立样本的t检验。P＜0.05认为有显著性差异。 结果: 1、21例患者中，20例获得造血重建，粒细胞植入中位时间为12天(11-19)天，血小板植入中位时间为12天(11-16)天。 2、免疫细胞恢复情况 2.1 T细胞:①CD3+细胞移植后1个月明显低于正常（896.69±124.08/ul vs1426.14±226.85/ul，P＜0.001）;移植后4.5个月数量恢复至正常(1202.50±235.35/ul vs1426.14±226.85/ul，P=0.159)。②CD3+CD4+细胞移植后恢复慢，移植后1个月低于正常水平（157.85±47.50/ul vs889.43±148.18/ul，P＜0.001），至移植后12个月仍低于正常水平(691.50±97.55/ul vs889.43±148.18/ul，P=0.018)。③CD3+CD8+细胞移植后1个月与对照组无明显差异（429.27±171.29/ul vs553.29±111.59/ul，P=0.110），在后续各监测点均无统计学差异。④CD4+CD25+FoxP3+ Treg细胞在移植后1个月恢复缓慢（3.41±1.99/ul vs17.86±7.91/ul，P＜0.001），至移植后12个月仍明显低于正常水平(10.13±3.02/ul vs17.86±7.91/ul，P=0.046)。T细胞亚群中CD3+CD8+细胞恢复较快，1个月可恢复正常;CD3+CD4+、CD4+CD25+FoxP3+细胞恢复缓慢，至移植后12个月仍明显低于正常。 2.2 CD19+B细胞移植后1个月明显低于正常（23.68±6.84/ul vs238.14±62.51/ul，P＜0.001），以后各监测点均低于正常，至移植后12个月基本恢复至正常(214.17±60.18/ul vs238.14±62.51/ul，P=0.381)。 2.3 CD16+CD56+NK细胞在移植后1个月即迅速恢复（249.77±64.70/ul vs293.64±64.59/ul，P=0.604），以后各监测点与对照组均无明显统计学差异。 2.4 mDC及pDC细胞:mDC移植后1个月恢复较慢(P＜0.001)，至移植后6个月仍低于正常（7.23±3.22/ul vs15.07±5.10/ul，P=0.006），移植后12个月接近正常水平（12.29±3.40/ul vs15.07±5.10/ul，P=0.412）;pDC移植后1个月明显低于正常（1.25±0.56/ul vs18.61±10.10/ul，P＜0.001），至移植后12个月恢复(P=0.498)。DC细胞恢复较慢，至移植后12个月接近正常。 3、免疫细胞恢复与急性GVHD21例行异基因造血干细胞移植患者发生Ⅲ-Ⅳ度急性GVHD的患者共5例(23.80％)。移植后100d内Ⅲ-Ⅳ度急性GVHD患者与未发生者免疫细胞亚群比较:CD3+细胞、CD3+CD8+细胞均明显增高（P值均＜0.05）;Treg、 CD3+CD4+细胞均明显降低（P值均＜0.05）。 4、免疫细胞恢复与疾病复发21例行allo-HSCT患者，3例复发(14.29％)，复发时间分别为(+30d，+124d，+135d)，其中2位患者T细胞亚群监测至移植后3个月。其CD3+、CD3+CD8+细胞在3个监测时间点均低于平均水平;CD3+CD4+、CD4+CD25+FoxP3+细胞在1-2月监测点高于患者平均恢复水平，至3个月低于患者平均水平。因病例数少，未做统计学处理。 5、免疫细胞恢复与HLA相合程度移植后1-3个月各监测点，HLA全相合组与HLA半相合组相比，CD3+CD4+、Treg细胞均增高（P值均＜0.05），CD3+CD8+组减低（P值＜0.05）;CD3+及DC细胞在1-3个月监测点中，均无差异(P＞0.05)。B细胞及NK细胞的3个监测点数据均显示HLA全相合组高于HLA半相合组(P＜0.05)。提示移植早期HLA全相合移植组CD3+CD4+、Treg细胞、CD19+细胞及NK细胞恢复均快于HLA半相合移植组。 结论: 1、异基因造血干细胞移植后CD3+细胞4.5个月时恢复至正常，其中CD3+CD8+细胞恢复快于CD3+CD4+、Treg细胞。CD19+B细胞及DC细胞12个月基本恢复正常。CD16+CD56+NK细胞恢复迅速，1个月可恢复至正常。 2、重度急性GVHD患者CD3+CD8+细胞亚群高于未发生者;CD3+CD4+、Treg细胞恢复慢于未发生者。 3、移植早期HLA全相合移植组CD3+CD4+、Treg细胞、NK细胞高于HLA半相合移植组;CD3+CD8+细胞组低于HLA半相合组。