论文部分内容阅读
目的 观察鼠白细胞介素12基因表达质粒(mIL-12质粒)肌肉注射对致敏小鼠气道高反应性、气道炎症及细胞因子的影响，并探讨其可能机制，为哮喘的IL-12免疫基因治疗提供实验依据。 方法 一、mIL-12质粒对气道高反应性的作用：BALB/c小鼠39只，分为4组。即致敏攻击组(n=10)：卵白蛋白(OVA)致敏+OVA气雾攻击；空质粒治疗对照组(n=10)：实验第14、16、18天，每鼠各肌肉注射空质粒100μg；mIL-12质粒治疗组(n=9)：实验第14、16、18天，每鼠各肌肉注射mIL-12质粒100μg；DXM阳性对照组(n=10)：实验第14天始，每鼠按0.5mg/kg的剂量腹腔注射DXM，每天一次，直至实验结束。末次OVA雾化攻击24小时后，以体积描记法测定各组小鼠气道高反应性。 二、mIL-12质粒对气道炎症和细胞因子的影响：BALB/c小鼠41只，分为6组。即致敏攻击组(n=8)；致敏不攻击组(n=6)：OVA致敏+生理盐水气雾；mIL-12质粒预防组(n=8)：实验第1、3、5天每鼠各肌肉注射mIL-12质粒100μg；mIL-12质粒治疗组(n=8)；空质粒预防对照组(n=5)：第1、3、5天每鼠各肌肉注射空质 洪江人会硕士《让价大Dklg粒100Vg：及空质粒治疗对照组，6卜末次OVA雾化攻击24小时后，对小鼠右侧肺叶行支气管用泡灌洗，而后显微镜下计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞的数目，用ELASA法测定BALF中的IL－4、IL－5及Y干扰素（IFN－Y冰平；左侧肺叶用 10％福尔马林固定，切片后 HE染色作病理学检查观察肺部炎症浸润情况。结果 一、mIL－12质粒对气道高反应性的作用：mIL－12质粒治疗组和 DXM阳性对照组可以有效地抑制Mob引起的气道高反应性，与致敏攻击组及空质粒治疗对照组比较有显著性差异（P＜．05或 P叼．of卜静脉注射 MCh使 CIL1 质粒治疗组及 DXM阳性对照组小鼠 Raw增加 100％所需的剂量①）分别为O．378士 0．112）＂g／kg和（0．503士0．129）＂g／kg，与致敏攻击组仰．187士0＊刀）＂g／kg］及空质粒治疗对照组广0二05士0刀59Ng／kgX较有显著性差异（动刀1或 P动刀5）；静脉注射Mob使mILJ 质粒治疗组及DXM阳性对照组小鼠Cdyn下降25％所需的剂量（PCZ ）分别为（．219土0．074）卜的g和（．232士0．083）卜的g，明显高于致敏攻击组仰J75土O刀5刀v叭g］及空质粒治疗对照组KO．178土0．0叩vwg）］的PC25，卜较也有显著性差异（＜0．05）。 二、mIL上 质粒对气道炎症和细胞因子的影响：致敏不攻击组炎症细胞总数、EOS数和 IL－4、IL－5、IFN－Y浓度分另为（1．4810．3V 108几、（0刀110刀3）X 10’／L和（23石t4．l）pyml、（33．215石）p旮ml、（725．e59．4）p旮ml，mIL－12质粒预防组为（2＊1功．31川l＊几、（0＊6切＊4）XI＊几和（42＊土13．1＊…1、（62．6士IO＊）＊ml、（626对土0＊＊咖1，ml卜12质粒治疗组为（2．17士人9）XI＊几、（O＊士．12）XI＊几和（38．l土l4．4）pg／ttil、（66．4士13．9）pg／ml、（661．e39．5）pg／ml，与致敏攻击组m．45ti．27）X 108／L、（2．97ti．20）X 108几和（122．e45．l）p旮ml、（126．e34．0）p旮ml、O35．e49．2加咖lX较有显著性差异什动力1）；mIL工 质粒预防组和治疗组分别与空质粒预防对照组K8．92t0．5幻XIO’A、（．96L0．9刀Xm’几和（lin．0t23．6）pyml、（112．ell二）p咖l、（46．e50．8）p咖l］及空质粒治疗对照组［（8．53士0．94）X心几、（2．llto．90）X旷几和（88．l土l6石）pg／ffil、（107．e6．4）pg／ml、＊．e64．3》g／mllLh较均有显著性差异（动刀1＼病理检查显示，mILl 质粒 2 衡江夭q硕士《位伯文8出口预防组和治疗组小鼠气道炎性浸润也明显减轻。结论 mIL质粒肌肉注射后能明显抑制小鼠气道高反应性，减轻致敏小鼠气道炎性浸润，尤其是对 EOS的减少。其作用机制可能是通过增加体内 IL刁 2的有效表达，调节哮喘小鼠Th厂 细胞的失衡，即上调Th细胞因子＊FN十）分泌和下调ThZ细胞因子（IL＊、IL6）分泌。本研究提示Thl／ThZ细胞平衡调节是哮喘气道炎症治疗药物的一个重要靶点，mIL－12质粒可能是一种潜在有效的哮喘防治药物。