论文部分内容阅读
目的长链非编码RNA(LncRNA,long non-coding RNA),是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA,因其没有完整的开放阅读框架,不具有蛋白质编码功能。现有的研究表明LncRNA在前列腺癌患者的发生、发展、转移等生物过程中扮演关键作用。本研究通过对肿瘤基因图谱(TCGA)中前列腺癌患者的LncRNA表达谱数据分析,我们课题组首次发现FAM66c在前列腺癌高危患者中高表达,可能为潜在的原癌基因,为此我们进一步对其研究,探讨其内在致病机制。方法1.依据FAM66c在临床前列腺癌患者中高表达和低表达的分组情况,结合临床数据用卡方检验和Wilcoxon非参数检验分析FAM66c表达水平和临床病理特征之间的关系。2.利用RT-PCR技术检测FAM66c在正常前列腺基质细胞和前列腺癌细胞中表达情况。3.通过特异性小干扰RNA(FAM66c siRNA)下调前列腺癌细胞中FAM66c的表达后进一步行MTT、克隆形成实验和划痕实验检测其对前列腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。4.用生物信息学方法分析FAM66c潜在靶点和细胞信号通路。结果1.FAM66c与患者临床病理密切相关:FAM66c高表达组患者术后肿瘤平均复发时间为30.91个月,低表达组平均术后无病状态大于180个月,高表达组患者的预后明显较差(P=0.026)。在疾病生存时间比较上,FAM66c高表达组患者的术后平均生存时间为81.1个月,低表达组术后平均生存时间大于180个月。FAM66c高表达组患者的术后生存时间明显较短,预后较差(P=0.0000355)。且FAM66c与临床病理分期、组织病理Gleason评分和生化复发指标密切相关(P<0.05)。2.相对于前列腺正常基质细胞WPMY-1,FAM66c在前列腺癌细胞株DU-145,22RV1,PC-3M-IE8细胞中显著高表达。3.利用siRNA下调FAM66c后明显抑制了前列腺癌细胞的增殖、迁移能力。4.生物信息学分析显示FAM66c可能通过EGFR、BCL2影响肿瘤细胞增殖。结论我们通过对TCGA中前列腺癌患者LncRNA表达谱的分析,首次发现了原癌基因FAM66c,其高表达能影响前列腺癌患者术后的预后。通过生物信息学分析发现FAM66c可能通过多种途径参与前列腺癌肿瘤的发生、发展。此外我们还通过体外实验证实下调FAM66c可以抑制前列腺癌细胞的增值和迁移。总之,本研究阐述了FAM66c作为一个新的原癌基因在前列腺癌细胞中的功能和可能的作用机制,为前列腺癌的临床诊断、治疗和预后判断提供了新思路。