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第一部分 帕金森病模型中去神经支配纹状体的蛋白质组学分析本实验对6-羟基多巴胺帕金森病模型中去神经支配纹状体蛋白质组的表达变化进行了研究。我们发现去多巴胺能神经元支配的纹状体提取液具有促进体外培养的胚胎腹侧中脑多巴胺能神经元存活的作用。为了进一步研究这一营养性作用的分子基础,寻找新的促进多巴胺能神经元损伤修复的因子,本实验利用双相凝胶电泳比较分析了去神经支配后纹状体蛋白质组的表达变化。结果显示,纹状体中绝大多数蛋白质的表达水平在去神经支配后没有明显差异,但少数蛋白质的表达水平发生了明显变化:7个蛋白质表达上升,4个蛋白质表达下降。经过基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱确定了其中8个蛋白质的种类,表达水平上调的蛋白质包括:淀粉样蛋白前体蛋白2(amyloid precursor-like protein 2, APLP2), 激肽原(kininogen), 葡萄糖激酶(glucokinase), 脑源一型α原肌球蛋白(tropomyosin αchain type brain-1, TMBR-1), 依钙蛋白Ⅰ轻链(calpactin Ⅰ light chain, Calpactin Ⅰ-lc);表达水平下调的蛋白质包括: 神经表皮生长因子样蛋白2(Neural epidermal growth factor-like 2, Nell 2), 甲状腺素受体β-2(thyroid hormone receptorβ-2, THRβ-2),小染色体维持因子6(Mini-chromosome maintenance 6, MCM6)。免疫组织化学染色表明黑质多巴胺能神经元共表达APLP2和酪氨酸羟化酶。6-羟基多巴胺损毁黑质纹状体通路后,APLP2在黑质致密带的表达随着多巴胺能神经元的死亡而降低,但是在去神经支配的纹状体和黑质网状带中APLP2的表达上升。而且,过表达硫酸软骨素修饰APLP2(APLP2-751)的中国仓鼠卵巢细胞系条件培养液具有促进体外培养的胚胎腹侧中脑多巴胺神经元存活的作用,过表达无硫酸软骨素修饰APLP2(APLP2-763)的中国仓鼠卵巢细胞系条件培养液不具有同样的作用。这些结果提示硫酸软骨素修饰APLP2对于黑质多巴胺能神经元可能具<WP=6>有保护和促进损伤修复的作用。