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[目的]探讨PBRM1(Polybromo-l)基因在人结直肠癌免疫治疗中的作用,为结直肠癌免疫治疗疗效判断提供新的潜在的生物标记物。[方法]1、采用RT-PCR检测94例人结直肠癌癌组织、配对的癌旁组织、正常组织中PBRM1mRNA的表达,并分析PBRM1表达与患者基线资料相关性;2、通过RT-PCR检测PBRM1mRNA在人正常肺上皮细胞Beas-2b和结直肠癌细胞RKO、SW620、SW480、HCT116 中的表达情况;3、选取低表达PBRM1的人结直肠癌细胞株SW620,利用慢病毒包装技术构建PBRM1干扰沉默/过表达的稳定细胞株及阴性对照细胞株,应用RT-PCR及Western Blotting验证稳定细胞株的建立;4、成功制备CTL后,药物组分为CTL组和CTL联合PD-L1单抗组,与以上4个稳定细胞株分别作用72h,采用MTS试剂检测不同细胞株CTL的杀伤活性;5、Tunel试剂盒检测药物作用72h后不同靶细胞的凋亡情况;6、ELISA试剂盒检测细胞培养上清中IFN-γ、IL-12及IL-10的表达水平。[结果]1.临床样本检测:94例人结直肠癌癌组织、癌旁组织、正常组织的PBRMlmRNA表达量逐渐升高,与正常组织相比差异均有统计学意义(F=46.727,P<0.001)。肿瘤组织PBRM1mRNA表达量与肿浸润深度呈低度正相关(Kendall’s tau-b=0.223,P=0.009)。2.细胞株检测:RKO、SW620、SW480、HCT116结直肠癌细胞的PBRM1mRNA表达量均低于人正常肺上皮细胞Beas-2b,差异均具有统计学意义(P<0.01)。3.RT-PCR及Western Blotting验证成功构建PBRM1干扰沉默/过表达SW620及对应的阴性对照稳定细胞株。4.PBRM1干扰沉默SW620中CTL杀伤作用比阴性对照组明显升高,PBRM1过表达SW620中CTL杀伤作用与阴性对照组相比明显降低,差异均具有显著统计学意义(P<0.001)。5.CTL或CTL联合PD-L1单抗免疫治疗对PBRM1干扰沉默/过表达SW620的凋亡影响与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。6.PBRM1干扰沉默SW620与CTL或CTL联合PD-L1单抗作用后分泌的IFN-γ水平对比阴性对照组明显升高,IL-12及IL-10水平降低;而过表达的结直肠癌细胞组对比阴性对照组分泌的IFN-γ水平都明显降低,IL-12、IL-10水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]1、PBRM1mRNA表达量在结直肠癌组织、细胞中低表达,与结直肠癌浸润深度呈低度正相关。2、低表达PBRM1的SW620增强CTL或CTL联合PD-L1单抗免疫治疗的敏感性。