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目的原发性醛固酮增多症(Primary aldosteronism, PA)因醛固酮过度分泌引起低肾素、低血钾、钠水潴留和高血压等症状,是继发性高血压最常见的病因。原醛症中最常见的两个亚型为：醛固酮瘤(Aldosterone-producingadenoma, APA)和特发性醛固酮增多症(Idiopathic hyperaldosteronism, IHA)。其中以醛固酮瘤最多见,约占原醛症的60%－90%,而醛固酮瘤发生机制至今仍不明确,目前临床上对原醛的诊断非常繁琐,且一部分醛固酮瘤患者在手术切除病灶后仍存在高血压,甲基化芯片具有高灵敏度、高通量、可重复性好等特点,我们的课题采用基因芯片筛查醛固酮瘤甲基化异常基因,并根据芯片结果研究醛固酮瘤与正常肾上腺组织中差异表达的基因,探讨醛固酮瘤可能的发病机制。方法首先收集5例醛固酮瘤组织和5例正常肾上腺组织,均经临床表现和术后病理证实,提取组织DNA,经亚硫酸盐处理后,采用Illumina Infinium HumanMethylation27 BeadChip,筛查醛固酮瘤组织中甲基化异常基因,采用AVG beta反应基因甲基化程度的高低,取值范围在[0-1]; Diffscore反应样品之间甲基化程度的差异,取值范围在[－375-375],正值代表甲基化程度升高,负值代表甲基化程度降低,取值在[100-375]和[－375-－100]差异有意义；然后收集9例醛固酮瘤组织和6例正常肾上腺组织,同样经临床表现和术后病理证实,根据芯片结果,对醛固酮瘤组AVG beta≥70%且Diffscor=374.34的4个基因,分别为BECN1、ATP2B4、ACAT1、MCCC1,采用real-time PCR技术研究这些基因在醛固酮瘤组织和正常肾上腺组织中的表达水平,明确基因高度甲基化是否影响其表达。结果醛固酮瘤组织与正常肾上腺相比较按照Diffscore≥100筛选出2622个基因甲基化程度升高,按照Diffscore≤-100筛选出6179个基因甲基化程度降低；在甲基化程度升高的基因中,醛固酮组AVG beta≥70%, 100≤Diffscore≤375的基因有8个；在甲基化程度降低的基因中,正常肾上腺组AVG beta≥70%,-375≤Di ffscore≤-100的基因有3670个；在验证的4个基因中,除ATP2B4的表达在原醛组和正常组间无统计学差异外,BECN1、ACAT1、MCCC1表达下调且差异具有统计学意义。结论通过基因芯片筛选甲基化异常基因,并进一步验证其表达改变,对筛选出甲基化异常基因和表达差异基因进行文献检索,确定其身份及功能,醛固酮瘤组织中甲基化程度升高的基因主要涉及到的功能是调节细胞周期、抑制细胞生长、促进蛋白质磷酸化、调节细胞代谢等；醛固酮瘤组织中甲基化程度降低主要涉及到的功能是促进肿瘤生长、调节细胞粘附、促进肿瘤转移、机体应激反应、加大胞吞作用等。BECN1、ACAT1、MCCC1基因在醛固酮瘤时甲基化程度增加,其基因的表达下降,这些基因中上调的基因按照功能分类包括抑癌基因、物质代谢相关酶类,可能参与PA的发病。我们发现的甲基化异常基因对醛固酮瘤发生、发展及今后的诊断和治疗具有重要的意义。