长角血蜱性信息素的主要成分及其功能

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蜱类为专性吸血的外寄生动物,是节肢动物中的一个特殊类群,传播多种人、畜和野生动物疾病,对人类健康和畜牧业造成极大危害。蜱类性信息素由吸血后雌蜱释放,刺激并吸引性活动的雄蜱,从而完成寻找配偶和交配过程,对生殖起关键作用。因此,对蜱类性信息素的研究对于控制其种群数量,减小危害有重要意义。本研究以广泛分布于我国的长角血蜱(Haemaphysalis longicornis Neumann)为研究对象,运用固相萃取、薄层层析、气相色谱和气相色谱-质谱联用等现代生物学及交叉学科的研究方法对多种收集方法得到的性信息素样品进行分析,鉴定其中主要化学物质的种类和含量,并通过生物测定确定其活性成分和生物学作用。本研究深入阐明长角血蜱性信息素的主要成分和生物学功能,对于蜱类防治有重要理论和实际应用意义。主要结果如下:长角血蜱交配期雄蜱对气流收集法、腺体浸提法和整蜱浸提法三种方法得到的样品均有一系列大致相同的反应:开始是第一对附肢在空中挥舞表现出积极的寻找行为;在15min内多数雄蜱会陆续停止爬行并停留在一定区域;最后将附肢收拢在躯体下面,保持静止不动的状态。气流收集法得到的样品对雄蜱吸引率最高。气流收集法、腺体浸提法和整蜱浸提法得到的性信息素样品对交配期雄蜱吸引率依次为:88﹪、76﹪和59﹪。性信息素样品提取方法的比较研究发现,不同收集方法样品成分种类和含量均由较大差异。气流收集法对保留时间较小的物质收集效率极高。这类物质挥发性很强,并且在结构上有共同点,均携带有数目不等的氯原子(六氯乙烷、五氯丙烷、八氯丙烷、六氯丙烷和七氯丙烷)。这类物质在长角血蜱中的生物学作用尚未确定。腺体收集法能够增加性信息素的提取量,在样品中检测到微量2,6-二氯酚(2,6-DCP)和含量较大的胆甾醇。整蜱浸提法对于保留时间小于12min的物质提取效率很低,而在14min-21min色谱峰比较集中,这种方法能够较好提取长角血蜱体表物质,如几种不同的长链脂肪酸和胆甾醇酯类等。本研究采用气相色谱-质谱联用方法在长角血蜱腺体提取物中鉴定出微量2,6-DCP,为吸引性信息素主要成分。气相色谱分析长角血蜱交配期雌蜱挥发物中可能存在另外一种结构类似的物质——2,4-DCP,与2,6-DCP的比例为1∶8.74,在生物测定中对交配期雄蜱吸引率达到62﹪,与2,6-DCP并无显著差异,2,4-DCP在长角血蜱交配中也有重要作用。本研究通过气相色谱-质谱联用方法鉴定出长角血蜱交配期雌蜱性信息素样品中存在胆甾醇、胆甾醇油酸酯和胆甾二醇乙酸酯。通过体表点滴法进行生物测定,发现胆甾醇、胆甾醇油酸酯和胆甾二醇二乙酸酯类似物胆甾醇乙酸酯三种标准样品均可使长角血蜱交配成功率显著恢复,可确定胆甾醇和胆甾醇油酸酯为长角血蜱MSP主要成分。本研究还首次在长角血蜱交配期雌蜱样品中发现长链饱和脂肪酸——十四烷酸、十八烷酸,这两种物质是长角血蜱GSP可能成分。
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