鹳榆止泻散提取工艺优化、毒性试验及药效学研究

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鹳榆止泻散是根据中兽医学基本理论,由老鹳草、地榆、苦豆草、小茴香和甘草五味中草药组成的中药复方,其中老鹳草与地榆作为君药,具有燥湿止泻的作用,苦豆草作为臣药,具有清热止泻的作用,小茴香与甘草共为佐使,具有健脾理气、调和诸药的作用,此方清热燥湿、健脾理气,可用于防治畜禽胃肠道疾病。本文对鹳榆止泻散的毒性及部分药效学作用进行了研究,并对该药提取工艺进行优化,完善鹳榆止泻散申报新药的材料,为其临床用药安全以及生产加工提供依据和参数。(1)运用薄层色谱法和高效液相色谱法,鉴别和分析鹳榆止泻散中没食子酸和苦参碱两种有效成分及其含量,采用Box-Behnken效应面法,以鹳榆止泻散干膏得率,没食子酸含量和苦参碱含量作为评价指标,筛选出鹳榆止泻散最佳提取工艺条件:以水为溶剂,提取2次,提取时间共3 h,加水量为16倍。(2)鹳榆止泻散急性毒性预试验未测得LD50,取10只小鼠以90 g·kg-1的剂量进行最大耐受量试验,所有小鼠均无中毒现象出现,表明鹳榆止泻散对小鼠最大耐受量为90 g·kg-1。取80只Wistar系大鼠随机分为4组,分别按鹳榆止泻散高(60 g·kg-1)、中(30 g·kg-1)、低(15 g·kg-1)剂量组灌胃,对照组灌胃等体积生理盐水,连续给药28天。期间无大鼠因中毒死亡,所有大鼠行为表现均未见异常,各给药组大鼠体重变化趋势与对照组一致,其血液生理指标、血液生化指标、脏器系数等数据与对照组差异不显著(P>0.05),对各组大鼠心脏、肝脏、脾脏等脏器进行病理组织学观察,均未见病理改变。(3)取50只昆明系小鼠随机分为5组,鹳榆止泻散高(50.4 g·kg-1)、中(25.2g·kg-1)、低(12.6 g·kg-1)剂量组,阿司匹林阳性对照组(13 mg·kg-1),空白对照组灌胃等体积生理盐水,连续给药3天后,于小鼠右耳耳廓涂抹二甲苯20μL,用打孔器取下小鼠左右耳耳片,分别称重,发现阿司匹林药物组及鹳榆止泻散高、中剂量均可极显著降低小鼠耳廓肿胀率(P<0.01),且高剂量组与阿司匹林组的肿胀抑制率差异不显著(P>0.05)。另取40只昆明系小鼠,按上述剂量给药,于第三天灌胃墨汁,解剖取出全部肠管,观察并记录墨汁在肠管中推进的距离及肠管全长。与空白对照组比较,各给药组肠推进率均显著降低(P<0.05)。筛选出鹳榆止泻散最佳提取工艺条件:以水为溶剂,提取2次,提取时间共3 h,加水量为16倍,无毒性作用,可显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,显著降低正常小鼠的肠推进率。
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