【摘 要】
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大量提取并纯化BAC DNA后,用Not I酶切分离出人包含完整人载脂蛋白apoA-Ⅰ基因簇的插入片段,利用Sepharose CL-4B柱经凝胶过滤支析快速分离了插灵敏度DNA片段和载体DNA,选择
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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大量提取并纯化BAC DNA后,用Not I酶切分离出人包含完整人载脂蛋白apoA-Ⅰ基因簇的插入片段,利用Sepharose CL-4B柱经凝胶过滤支析快速分离了插灵敏度DNA片段和载体DNA,选择合适浓度的DNA经显微注射制作转基因小鼠,并成功地建立了相关的转基因动物.获得了5个独立的包括完整基因族的转基因鼠株系RNase保护实验检测结果显示转基因小鼠体内的人载脂蛋白基因表达呈现正确的组织特异性;但各株系间的表达水平存在一定的差异,显示为一定的整合位点依赖性的表达.转基因小鼠血脂浓度升高明显,提示所转基因的表达产物影响血脂代谢.各株小鼠携带的转基因均能传给后代,小鼠子一代阳性率约为50﹪,符合孟德尔遗传定律.由此表明我们建立了适当的BAC介导的载脂蛋白基因簇的转基因动物系统.
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