伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus,PRV）是一种能引起猪等多种动物患病的疱疹病毒,给养猪业带来了巨大的危害。目前,猪伪狂犬病的防治主要依靠疫苗,但是近年来发现疫苗不能有效抵抗新流行的变异PRV毒株,且无针对PRV的特效药,因此急需寻找PRV防控的新途径。本课题优化山柰乙醇提取物的制备工艺,并研究其在体内、体外抗PRV活性,为中药防治伪狂犬病提供新的方法,同时也为抗疱疹病毒中药的研发提供新的思路。主要研究内容和结果如下:1山柰提取物的制备以超声提取法制备山柰粗提物,并优化其提取工艺。以山柰总黄酮提取得率为评价指标,通过单因素试验分析不同提取时间（80～140 min）、超声功率（50～300W）、乙醇浓度（30%～90%）以及料液比（1:5～1:30 g/m L）对提取率的影响;在此基础上,结合Box-Behnken中心组合试验设计原理,参照二阶多项式模型拟合回归方程,并重复验证。结果表明,随着提取时间、超声功率及乙醇浓度的增大,山柰总黄酮提取率会先增加后降低;响应面分析拟合方程可知各系数拟合度良好;最大化拟合方程后得到山柰总黄酮提取的最佳提取条件为:乙醇浓度80%、超声功率208W、每次98min。山柰提取物中黄酮的提取率为2.82%。2山柰提取物体外抗伪狂犬病毒活性研究通过CCK-8法检测山柰提取物对PK-15细胞的毒性以及对PRV引起PK-15细胞病变的抑制率。结果显示,山柰提取物对PK-15细胞的半数有毒浓度CC50为313.53±19.59μg/m L,半数抑制浓度IC50为55.85±4.76μg/m L,治疗指数为5.61。通过Taq Man探针荧光定量PCR法检测山柰提取物对病毒感染不同阶段（对病毒感染细胞的保护、吸附、穿入和胞内繁殖）的抑制作用和不同加药时间对山柰提取物抗PRV活性的影响。结果表明,山柰提取物主要抑制PRV穿入宿主细胞胞内繁殖阶段。在PRV感染细胞后第0h、2h、4h、8h、16h、24h分别加入山柰提取物均能显著抑制病毒的增殖,但随着加药时间的延迟,其抗病毒效果降低。由以上结果可知,山柰提取物具有显著的抗PRV活性,作用机制主要为抑制病毒感染的胞内繁殖阶段。3山柰提取物体内抗伪狂犬病毒活性研究通过腹腔注射病毒液建立SPF小鼠感染PRV模型,灌胃给予不同剂量的山柰提取物,以存活率、脑组织病毒拷贝数等指标检测山柰提取物体内抗PRV活性。结果显示,在病毒感染后第5天,病毒对照组的存活率为40%,山柰提取物的存活率为50%～90%。山柰提取物能显著降低脑组织中病毒的繁殖,表明山柰提取物能抑制病毒的体内复制。通过ELISA试剂盒测定小鼠血清中细胞因子的含量,结果显示山柰提取物可使PRV感染小鼠的IL-4、IFN-α、IFN-γ和TNF-α恢复到正常水平。由以上结果可知,山柰提取物能提高感染PRV小鼠的存活率,降低脑组织中的病毒拷贝数和调节血清中部分细胞因子的水平。