蓝色丝膜菌次生代谢产物及体外抗氧化活性研究

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本研究以从长白山采集到的蓝色丝膜菌Cortinarius caerulescens(Schaeff.)Fr.的子实体做为实验材料,对其甲醇提取液的不同萃取相(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)和萃余水相通过DPPH自由基清除法测定抗氧化活性。利用TLC薄层色谱法和硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相柱色谱,配合抗氧化活性测试,跟踪分离活性化合物。并通过质谱(HR-ESI-MS)和核磁共振(1H和13C NMR)等光谱方法,结合文献波谱数据对比,鉴定得到的单体化合物。最后通过DPPH自由基清除法和DCFH-DA染色法对化合物的抗氧化活性进行评价,得到以下结果:(1)经测定蓝色丝膜菌的甲醇提取物中,乙酸乙酯相表现出高于其他萃取部分(石油醚相,正丁醇相,水相)的抗氧化能力,其IC50=46.86±0.36μg/ml。(2)于蓝色丝膜菌甲醇粗提物的乙酸乙酯相中分离得到共18种单体化合物,经鉴定分别为:(1)1,4-二羟基蒽醌(quinizarin);(2)大黄素(emodin);(3)6-羟基芦荟大黄素(citreorosein);(4)大黄素1-甲醚(emodin 1-O-methyl ether);(5)虫漆酸D(laccaic acid D);(6)山扁豆酸(endocrocin);(7)?-羟基大黄素-8-甲醚(questinol);(8)芦荟大黄素-6,8-二甲醚(citreorosein 6,8-dimethyl ether);(9)大黄素甲醚(physcion);(10)SEK 15b;(11)cassiamin B;(12)穗花衫双黄酮(endothianin);(13)(3S,3’S,P)-anhydrophlegmacin-9,10-quinone 8’-O-methyl ether;(14)rufoolivacin C;(15)rufoolivacin A;(16)dirufoolivacin;(17)sinapiquinone;和(18)8-O-methylbostrycoidin。这是首次对蓝色丝膜菌次生代谢产物的分离纯化报道,其中化合物1-5,7,10-12,18为首次从丝膜菌属中分离得到。(3)对18种化合物分别鉴定其抗氧化活性,化合物16,15和14表现出较强的DPPH自由基清除活性,IC50(半数最大抑制浓度)值分别为2.77,7.50和8.63μg/ml。综上结果表明,蓝色丝膜菌的子实体中分离得到的化合物具有较好的抗氧化活性,基于该真菌材料尚未得到有效的开发利用的现状,这使得其在食品天然抗氧化剂和医药领域有着深厚的开发潜力,用以对抗由于氧自由基积累所引起的一系列神经退行性疾病。同时该研究也对蓝色丝膜菌这一稀少资源的保护和应用做出一定贡献。
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