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目的:明确mi R-20b-5p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨mi R-20b-5p靶向AEN调控鼻咽癌细胞增殖及凋亡的作用机制。方法:采用q RT-PCR检测mi R-20b-5p在鼻咽癌患者血清,鼻咽癌细胞株CNE1、HNE2、HONE1以及永生化的正常鼻咽上皮细胞NP69中的表达情况;以鼻咽癌细胞CNE1、HONE1为研究对象,分别转染NC对照、mi R-20b-5p mimics和mi R-20b-5p inhibitor上调或下调mi R-20b-5p的表达,并采用q RT-PCR检测进行验证细胞。平板克隆形成实验、CCK8法、裸鼠成瘤实验从体内外分别分析mi R-20b-5p表达改变对细胞集落形成、细胞增殖、裸鼠成瘤的影响;流式细胞术检测mi R-20b-5p mimics和mi R-20b-5p inhibitor转染48 h后细胞凋亡情况;采用生物信息学分析预测mi R-20b-5p下游靶基因,并采用荧光素酶报告基因检测进行验证;Western blot法检测mi R-20b-5p表达改变对细胞AEN、Caspase3、Parp、Bax、Bcl-2、Bcl-xl等凋亡蛋白的表达影响。此外,分析转染mi R-20b-5p mimics同时过表达AEN,或者转染mi R-20b-5p inhibitor同时与敲低AEN表达,分别采用CCK8法、流式细胞术、Western blot检测上述鼻咽癌细胞增殖、凋亡情况,以及AEN、Caspase3、Parp、Bax、Bcl-2、Bcl-xl等蛋白的表达改变。结果:在鼻咽癌细胞中mi R-20b-5p的表达明显高于正常鼻咽上皮细胞(P<0.001),而且mi R-20b-5p在鼻咽癌患者血清中的表达也明显高于健康人(P<0.0001),临临意义分析显示,mi R-20b-5p高表达与鼻咽癌患者的大肿块和较晚的临临分期明显正相关(P<0.01)。用mi R-20b-5pmimics转染可明显上调鼻咽癌细胞mi R-20b-5p的表达,而转染mi R-20b-5p inhibitor可明显下调mi R-20b-5p的表达(P<0.001)。转染mi R-20b-5p inhibitor下调mi R-20b-5p后,细胞的克隆形成能力明显减弱,细胞增殖明显受到抑制,细胞凋亡明显,裸鼠皮下种植瘤生长缓慢;而当转染mi R-20b-5p mimics上调mi R-20b-5p后,细胞的克隆形成能力、细胞增殖能力明显增强,细胞凋亡显著减少,裸鼠皮下种植瘤生长明显增快。生物信息学预测显示AEN是mi R-20b-5p下游靶基因,并且荧光素酶报告基因检测显示mi R-20b-5p确实可以靶向抑制AEN的转录活性。同时我们研究发现,过表AEN可明显抑制鼻咽癌细胞增殖,诱导鼻咽癌细胞凋亡,而沉默AEN的表达显著促进鼻咽癌细胞增殖,抑制其凋亡;当转染mi R-20b-5p mimics同时过表达AEN,可明显削弱mi R-20b-5p对鼻咽癌细细胞增殖以及抗凋亡作用的促进,而转染mi R-20b-5p inhibitor同时与敲低AEN表达,可明显抵抗mi R-20b-5p敲低对鼻咽癌细胞增殖和抗凋亡的抑制作用。进一步研究发现,mi R-20b-5p inhibitor可明显上调AEN、Caspase3、Parp、Bax等蛋白的表达,下调Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达P<0.05);mi R-20b-5p mimics则明显下调AEN、Caspase3、Parp、Bax等蛋白的表达,上调Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达P<0.05)。结论:1.mi R-20b-5p在鼻咽癌中高表达,并与鼻咽癌患者的临临分期正相关,可能是鼻咽癌潜在的生物标志物;2.mi R-20b-5p促进鼻咽癌细胞增殖,其机制与靶向下调AEN表达抑制鼻咽癌细胞凋亡相关。