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(一)两种分型方法在HLA二类分型中的比较研究
[目的]同步双盲法比较研究单克隆抗体法和基因芯片法在HLA分型中的准确性、重复性和实用性。
[方法]研究样本46份,单克隆抗体法采用一步法单抗分型技术,基因芯片法采用寡核苷酸芯片技术。
[结果]30份标本的单克隆抗体法和基因芯片法分型成功,对有差异的结果进行基因芯片法复查,重复率100%。单克隆抗体法耗时1.5小时,基因芯片法耗时3.5小时。基因芯片法的漏检率低于单克隆抗体法。两种方法主要在对DR2(DR15,DR16)的检测结果上不一致。
[结论]目前HLA-Ⅱ类抗原的分型,尤其是临床大样本分型,还是可以采用单克隆抗体分型技术进行快速分型。对于要求精细配型的骨髓移植,应该采用基因芯片分型或其他DNA分型技术。对于单克隆抗体分型结果可疑的样本应用基因芯片分型确认。
(二)三种分型方法在HLA二类分型中的比较研究
[目的]比较研究单克隆抗体法,PCR-SSP(polymerasechainreactionwithsequence-specificprimers)法和基因芯片法在HLA分型中的准确性、重复性和实用性。
[方法]研究样本80份,单克隆抗体法采用一步法单抗分型技术,PCR-SSP法采用序列特异性引物PCR,基因芯片法采用寡核苷酸芯片技术。
[结果]80份标本,采用单克隆抗体法,PCR-SSP法和基因芯片法分型成功,对有差异的结果进行基因芯片法复查,重复率100%。单克隆抗体法耗时1.5小时,PCR-SSP法和基因芯片法都耗时约3.5小时。单克隆抗体法检测的结果与其他两种方法的结果相比有显著性区别,而PCR-SSP法和基因芯片法的检测结果相互一致。单克隆抗体法的漏检率和错检率都高于PCR-SSP法和基因芯片法。
[结论]目前HLA-Ⅱ类抗原的分型,尤其是临床大样本分型,可以采用单克隆抗体分型技术进行快速分型。对于要求精细配型的骨髓移植,应该采用基因芯片分型或或者PCR-SSP法等其他DNA分型技术。对于单克隆抗体分型结果可疑的样本应用基因芯片分型确认。