草莓再生体系的优化及转JERF<,33>基因提高其抗病性的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Aweichunxing890620
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草莓是一种重要的多年生常绿草本植物,其果实味道鲜美,营养丰富,经济价值高,既可用于鲜食,又可用于加工,深受人们的喜爱。但由于各种病害的危害,草莓的产量和品质受到严重的影响。因此提高其抗病性对草莓生产具有重要的实际意义。草莓转基因已有成功的报导。通过转基因的手段来增强植物的抗病性是一种行之有效的方法,转入特定的病程相关基因(PR基因)能增强植物对某种或某几种特定病害的抵抗能力,但要获得多抗、高抗的品种,就必须同时转入多个基因,就目前技术而言是难以做到的。导入调节抗逆基因表达的转录因子基因可能对全面增强作物抗逆性提供了一种全新的途径。本研究主要以丰香、章姬为试材,对再生体系进行了优化,在此基础上,利用农杆菌介导法将转录因子基因JERF33基因导入草莓中。对抗性植株进行PCR、DNA点杂交检测,获得了转基因草莓植株。对转基因植株接种炭疽病试验发现,其抗炭疽病能力显著增强。本试验获得的主要结果如下:1.建立了丰香、章姬的叶片高效再生体系,其再生率均达到100%,其中丰香最适培养基配方为1/2MS+2,4-D0.10mg/L+TDZ4.0mg/L,其平均再生芽数为3.5个,章姬最适培养基配方为1/2MS+2,4-D0.07 mg/L+TDZ4.0 mg/L,平均再生芽数目达到4.6个。2.草莓叶片外植体进行一个星期的暗培养有利于其不定芽再生率的提高。3.对章姬草莓叶片进行转基因,经过Km筛选再生出的植株进行PCR检测,其阳性率为5.4%;对PCR检测的阳性株进行DNA斑点杂交,其阳性率为66.7%。证明本研究已成功地将JERF33基因导入章姬草莓中。4.对转JERF33基因草莓叶片进行针刺法接种炭疽病,结果表明转基因株与对照株相比其抗性显著增强。
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