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研究背景及目的食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,在恶性肿瘤中居第八位。食管癌在我国发病率和死亡率较高,其死亡率占恶性肿瘤死亡率的第四位.我国食管癌主要以鳞癌为主,大约占90%。食管癌患者早期临床表现不明显,多数患者因吞咽困难等就诊,此时已处于癌症晚期,且大多数患者存在全身转移,转移扩散是其预后不良的首要原因。在前期研究中我们通过磷酸化质谱分析新发现食管鳞癌组织内NM IIA重链Tyr1408高酪氨酸磷酸化,其磷酸化与DDR1密切相关；DDR1在食管鳞癌组织中的高表达能促进肿瘤侵袭和转移。NM IIA重链磷酸化后能抑制自身转配促进细胞迁移。因此,我们推测DDR1通过结合并磷酸化NMⅡA促进食管鳞癌转移。我们拟试图证明DDR1与NMⅡA在食管鳞癌中高表达,且两者密切相关,为下一步验证DDR1是磷酸化NMⅡA的激酶,明确NMⅡA磷酸化与食管鳞癌侵袭和转移关系,为食管磷癌转移机制的更深入研究提供新的方向。方法在第一章中我们收集了10对食管鳞癌及癌旁组织标本,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测食管鳞癌组织及癌旁组织中DDR1蛋白及NMⅡA蛋白的表达量。在第二章中我们培养了KYSE-510食管鳞癌细胞株,通过蛋白质印迹法检测了在食管鳞癌细胞株KYSE-510中DDRI蛋白及NMⅡA蛋白的表达量,并通过蛋白的免疫共沉淀实验(immunoprecipitation)证明在KYSE-510食管鳞癌细胞株中DDRI蛋白和NMⅡA蛋白在细胞内有结合,且两者关系密切。结果1.在10对食管鳞癌及癌旁组织中通过Western blot检测,发现食管鳞癌组织及部分癌旁组织中有DDRI蛋白及NMⅡA蛋白表达,且DDRI蛋白及NMⅡA蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织。2.在KYSE-510食管癌细胞株中,通过蛋白质印迹法发现该细胞株中表达DDRI蛋白和NMⅡA蛋白,并通过蛋白的免疫共沉淀实验证明DDR1蛋白和NMⅡA蛋白在KYSE-510食管鳞癌细胞株中有结合,且两种蛋白密切相关。结论1.应用Western blot技术对食管鳞癌及癌旁组织进行了DDRI及NM ⅡA蛋白质组学分析,食管鳞癌组织及部分癌旁组织中有DDRI蛋白及NM ⅡA蛋白表达,且DDRI蛋白及NMⅡA蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织。2. KYSE-510食管鳞癌细胞株中表达有DDRl蛋白和NMⅡA蛋白,并且两者在细胞株内有结合,两者密切相关。