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目的细胞自噬是细胞在遇到环境压力下,细胞内形成具有双层或多层包膜将细胞器包裹并形成吞噬泡,从而发生细胞器的降解和转化,以细胞的程序性死亡为最终结局的过程。近期研究发现许多肿瘤细胞出现自噬功能的异常,但其机制仍尚不清楚,因此研究自噬的分子机制及自噬与肿瘤的关系对于肿瘤防治有重大意义。胃癌是当今世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,其在我国消化系统恶性肿瘤中位居首位。本研究拟通过免疫组化检测自噬相关蛋白Beclinl、P62和IDH1在胃癌及癌旁组织中的表达情况,对其实验数据进行分析,研究三者与胃癌的相关性及临床病理特征的关系。进而探讨自噬活性的改变与胃癌发生、发展的相关性,为自噬调控机制在胃癌中的研究提供可靠的理论依据。方法本研究收集2012年10月~2015年10月期间(解放军第八十八医院)胃癌手术切除,术后经病理专家证实为胃癌组织标本64例,癌旁组织64例(取自距肿瘤组织2cm以外的组织)。采用免疫组织化学法(S-P法)标记Beclin1、P62与IDH1蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况,并且结合患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、是否有淋巴结转移、TNM分期及浸润深度等临床病理资料进行综合分析。所有实验数据均采用SPSS 20.0统计软件来完成统计学处理,计数资料采用χ~2检验方法进行组间比较;采用Spearman相关分析进行变量间的相关性检验,并用Kappa检验进行一致性分析;等级资料采用秩和检验(Mann-Whitney检验)进行组间比较。α=0.05为检验水准。结果1.Beclin1在胃癌细胞膜和细胞质中均有表达,为棕黄色染色,强阳性时细胞核、间质细胞亦染色.P62蛋白在胃癌组织中阳性主要表达于细胞核中.异柠檬酸脱氢酶1蛋白(IDH1)的阳性表达聚集于细胞浆中。Beclin1、P62和IDH1在胃癌组织中的阳性表达率分别为53.1%(34/64),46.9%(30/64),54.7%(35/64)。在癌旁组织中阳性表达率分别为50.0%(32/64),28.1%(18/64),84.3%(54/64)。三种蛋白在各自不同组织中的表达水平差异经秩和检验,均具有有统计学意义(z_s=3.599,P<0.001)(z_s=2.350,P=0.019),(z_s=5.149,P<0.001)。2.Beclin1在高、中、低分化胃癌组织中阳性表达率分别为58.3%(7/12),69.2%(18/26),34.6%(9/26),P62在高、中、低分化胃癌组织中阳性表达率分别为66.7%(8/12),57.7%(15/26),26.9%(7/26),IDH1在高、中、低分化胃癌组织中阳性表达率分别为33.3%(4/12),46.2%(12/26),73.1%(19/26),各自差异均具有统计学意义(P<0.05)。P62与肿瘤直径≥5cm有关(χ~2=20.127,P<0.001);P62、IDH1与淋巴结是否转移有关(χ~2=10.458,P<0.001),(χ~2=10.092,P=0.001)。3.Spearman相关分析结果显示:Beclin1与P62蛋白表达未见明显相关性,(r_s=0.192,P=0.128;Kappa=0.191,P=0.124)。Beclin1与IDH1蛋白表达呈正相关(r_s=0.403,P<0.001;Kappa=0.403,P<0.001)。IDH1与P62蛋白表达呈负相关(r_s=-0.277,P=0.027;Kappa=0.274,P=0.027)。结论1.Beclin1、IDH1蛋白在胃癌组织中表达下调,P62在胃癌组织中表达水平上调,提示胃癌组织中自噬水平降低。2.Beclin1蛋白的表达水平与胃癌组织分化程度相关;IDH1的表达水平与胃癌的组织分化程度、淋巴结转移相关;P62蛋白表达水平与胃癌组织分化程度、淋巴结转移和肿瘤直径≥5cm相关。3.在胃癌发生中Beclin1和IDH1的表达呈正相关,P62与IDHI的表达呈负相关,Beclin1和P62的表达未见相关性,提示我们在胃癌发生中三者可能具有一定的作用。