去端肽胶原蛋白生物材料结构设计、制备及应用

来源 :中国地质大学(北京) | 被引量 : 4次 | 上传用户:ssttll
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胶原蛋白是一种三股螺旋结构的细长纤维,胶原分子的N和C端具有一个氨基酸序列,称为端肽,这种肽决定了胶原的抗原性。去除端肽区域肽链序列的胶原蛋白,称为去端肽胶原蛋白。该材料具备优异的免疫原性、生物相容性和生物可降解性,可以通过不同的方法制备成不同结构和功能的生物材料,用于各种医疗用途。本文以去端肽胶原蛋白的制备和表征为基础,通过对材料结构的设计、制备,研究多种去端肽胶原蛋白生物医用材料的理化性能、生物相容性及其应用。首先通过酶解法制备去端肽I型胶原蛋白凝胶,通过电泳法、氨基酸分析法、ELISA检测试剂盒检测法等表征去端肽胶原蛋白的性能,结果表明,去端肽胶原蛋白的纯度达99.8%,胶原蛋白的C端肽和N端肽已经被去除。率先通过α-Gal抗原检测,证明去端肽I型胶原蛋白中α-Gal抗原含量降低到检测限以下,通过去端肽方法可以有效去除天然胶原蛋白的免疫原性。其次,以胶原凝胶为基础制备了去端肽胶原蛋白多孔材料,通过傅里叶变换红外分析、扫描电镜、拉伸强度和吸水力等手段表征了去端肽胶原蛋白在加工过程中的变化情况。结果表明,热处理和灭菌过程对胶原蛋白的三螺旋结构的影响在可接受的范围内,并且在溶液中能够较持久的保持多孔支架结构。通过体外降解实验研究、大鼠肝脏和股静脉动物实验模型,研究了其降解性能和在体内止血、填充领域的应用效果。该材料已经实现产业化转化并完成了临床试验验证。再次,通过体外分子自组装工艺制备了双层结构的去端肽胶原蛋白引导组织再生膜,通过扫描电镜、拉伸强度、羟脯氨酸含量、吸水性与溶胀检测等方法,表征了去端肽胶原蛋白膜的结构、力学性能和可使用性能。结果表明,去端肽胶原膜经过体外分子自组装工艺加工后,材料的拉伸强度得到提升,能够满足引导组织再生使用时缝合的需要。验证了辐照法病毒灭活,同时研究了去端肽多孔材料和胶原膜的生物相容性,而且该材料已经实现产业化转化并得到了临床应用。最后,制备了羟基磷灰石/去端肽胶原复合骨修复材料,并通过调整工艺参数如成分比率等,制备了不同羟基磷灰石和胶原含量比例的复合材料。通过扫描电镜、傅里叶变换红外分析、原子力显微镜、接触角测试等方法,表征了羟基磷灰石/胶原复合材料的结构和性能,通过模拟药物负载和缓释效果验证,建立了该材料用于载药和药物缓释的前景。细胞实验和动物实验证明了该羟基磷灰石/胶原复合材料具有很好的生物相容性,在生物体内能诱导骨再生,该材料已经在动物医疗领域开展了临床应用。
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