背景与目的食管癌(esophageal carcinoma)是人类常见的恶性肿瘤之一。全世界每年约30万死于食管癌，其中50％在我国，每年因食管癌死亡的人数约占我国全部恶性肿瘤死亡总数的1／4，严重危害人类健康。食管癌按病理学类型主要分为鳞状细胞癌和腺癌。在中国主要以鳞状细胞癌为主。食管癌的病因尚不十分清楚，一般认为与强致癌物的存在、食管损伤、食管疾病以及食物的刺激作用、营养不良和微量元素缺乏及遗传因素等多方面因素有关。与其他恶性肿瘤的生物学特性一样，食管癌同样具有侵袭与转移的特征。而且，由于食管癌的早期临床症状不明显，发现时已属中晚期，使得早期诊断率很低，治愈率大大降低，预后差。因此，对食管癌的早期诊断及侵袭与转移机制发面的研究非常重要，其意义在于可以通过提前发现并阻止肿瘤的侵袭与转移，配合手术、放疗、化疗等手段对肿瘤进行综合治疗，从而提高食管癌的治愈率，改善患者的预后。随着细胞分子肿瘤学的发展，现已证实：食管癌的发生发展是多因素共同作用于食管癌相关基因及调控因子，引起相关基因结构及表达水平改变，最终导致食管癌的发生。目前普遍认为，癌基因的激活和抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础。癌基因的激活和抑癌基因的失活的相互作用，尤其是抑癌基因的失活越来越引起人们的重视。癌基因由原癌基因激活而来，存在于正常细胞的癌基因称为原癌基因，是细胞基因组的正常成分，只有经某些因素作用后，原癌基因的结构改变和激活成为癌基因，才具有致癌活性；抑癌基因从概念上来说，凡是产生直接或间接抑制细胞增殖、癌变的肿瘤抑制基因，都可称为抑癌基因。通常认为癌基因和抑癌基因是一对矛盾的统一体，互相制约，形成一种平衡，控制着细胞的生长和分化，细胞分化异常导致上皮细胞发生恶性转化是食管鳞癌发生的重要机制之一。由于机体经常受到外界环境中有害因素的侵害，为防止细胞的癌变发生，需要抑癌基因处于一定程度的表达，通常是低水平表达。当物理化学因素导致DNA损伤，而修复基因修复失败，导致基因突变，或者病毒致癌因素整合到DNA中，导致基因突变，从而导致原癌基因激活，或抑癌基因失活，产生突变细胞；若免疫监视失败，形成单克隆或多克隆增殖，进而浸润或转移，最终形成肿瘤。抑癌基因是通过纯合缺失或失活而引起恶性转化的基因，其在控制细胞生长、增殖及分化过程中起着十分重要的负调节作用，并能潜在抑制肿瘤生长。反之，则可导致细胞恶性转化而发生肿瘤。有实验表明，正常细胞与癌细胞在体外培养条件下融合后，其杂交细胞的致癌性降低或消失。其机制是正常细胞中含有癌变的基因，即抑癌基因，也称肿瘤抑制基因。在细胞癌变过程中，不仅仅是由于原癌基因的激活，而且涉及抑癌基因的失活。当前多方面资料表明，fez(亮氨酸拉链肿瘤抑制基因leucine zipper tumor suppressor，fez／lztsl，下简称fez)、lrigl(亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域，leucine rich repeats and immunoglobulin like domains，下简称lrigl)基因是抑癌基因，迄今为止，在人类多种肿瘤中均可检测到fez、lrigl基因的异常表达。我国是食管癌高发地区，对食管癌组织fez、lrigl基因的研究，迄今为止，尚未见报道。鉴于此，我们应用逆转录多聚酶链反应技术(reverse trancriptase polymerase chain reaction，RT-PCR)分析法检测fezmRNA、lrigl mRNA在食管癌标本各组织中(癌组织、癌组织及远癌粘膜组织)的表达情况，为食管癌的早期诊断、预后评估及基因诊治探索可行的途径。材料和方法(1)河南省肿瘤医院胸外科2006-03／2006-08月行手术切除的食管癌住院患者36(男26，女10)例，年龄62.17±7.2岁(40～75岁)；术前均未接受化、放疗，肿瘤组织经病理学检查证实均为鳞状上皮细胞癌；标本均在手术中收集，取材后速冻于液氮中，后于-80℃超低温冰箱中贮存备用。标本取材大小均约0.5cm×0.5cm×0.2cm；癌组织均在原发灶取材，避开坏死、炎症区域；癌旁组织取自相应肿块旁2cm的食管黏膜组织；远癌组织均取自距肿块边缘5cm以上的食管黏膜组织。(2)提取组织中总RNA，用RT-PCR方法扩增目的基因fez、lrigl。同时扩增GAPDH基因做为内参照基因对fez、lrigl做半定量分析，检测fezmRNA、lrigl mRNA分别在癌组织、癌旁组织及远癌黏膜组织中的表达情况。(3) fez mRNA、lrigl mRNA的表达水平以均数±标准差表示，统计工具采用SPSS13.0统计分析软件。根据资料类型采用t检验、ANOVA、X~2检验及Fisher’s Exact Test。取P＜0.05为差异有统计学意义。结果36例食管远癌黏膜组织中均有fez mRNA、lrizl mRNA阳性表达，癌旁组织中有33例(91.7％)fez mRNA阳性表达，33例(91.7％)lrigl mRNA阳性表达；而食管癌组织中fez mRNA、lrigl mRNA阳性表达数分别为14例(38.9％)和15(41.7％)例；表达缺失分别为22例和21例。经统计学分析，fez mRNA、lrigl mRNA在食管癌癌组织的阳性表达水平低于在癌旁组织和在远癌组织中的表达；且在癌旁组织中二基因mRNA的表达也低于在远癌组织中的表达；随着分化程度的增强(低分化→高分化)二基因mRNA的阳性表达率逐渐增加；统计学结果显示低分化、中分化组与高分化组有明显的统计学差异，而中分化、高分化组比较无显著性差异；但二基因mRNA的表达与有、无淋巴结转移、食管癌浸润深度、患者的年龄、性别及食管癌的临床病理分型均无统计学差异。结论1．fez mRNA、lrigl mRNA在食管癌组织中均呈下调表达或表达缺失。2．fez mRNA、lrigl mRNA在食管癌组织中的阳性表达率随分化程度的增加而逐渐升高。3．fez、lrigl基因可能在食管癌的发生、发展过程中发挥抑癌基因的作用，可能是侯选的肿瘤抑制基因。