自体卫星细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

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目的 成人心肌细胞缺乏再生能力,急性心肌梗死造成大量具有收缩功能的心肌细胞丧失及梗死后心室重构是引成心功能衰竭的原因。骨骼肌卫星细胞(Satellite Cell,SC)是骨骼肌的干细胞,在骨骼肌修复过程中起着重要作用。我们试图通过移植SC来治疗心肌梗死,改善心功能。 材料与方法 雄性苏中幼猪10头,随机分成实验组与对照组,每组各5头。实验组采用改良Dorfman法提取、纯化、培养SC。4w后开胸结扎冠脉第二对角支起始端制作急性心肌梗死模型。实验组心肌内注射种植体外扩增的自体SC,对照组注射等量M199细胞培养液。术前3d、术后1w、术后4w单电子发射计算机断层扫描机(SPECT)行心血池显像检查,了解治疗前后的心功能变化,评估SC移植对心肌梗死的治疗作用。术后4w处死动物,取出心脏标本,石蜡切片HE染色光镜检查和透射电镜检查观察SC存活和分化情况,据此推测SC移植改善心功能的机制。 结果 (1)SC体外培养3d后贴壁,呈梭形,此后呈多形性。延迟分瓶或降低培养液中胎牛血清(Fetus Bovine Serum,FBS)浓度,SC生长停滞,相互融合形成肌管;(2)开胸结扎冠脉第二对角支后,在左室前壁形成一约3×3cm2透壁梗死区,该部位心肌坏死完全,心功能检测左室各项指标下降明显;(3)对照组梗死区内为均质疤痕,成纤维细胞增生,无残存的心肌细胞;实验组梗死区内见新生的带横纹的肌纤维,排列方向大体一致,该细胞多核,核位于周边,细胞间未见闰盘样结构;(4)实验组术后左室射血分数(EF)、1/3射血分数(1/3EF)、1/3充盈分数(1/3FF)优于对照组。 结论 SC易于获取和体外扩增培养,移植于自体心脏可存活,无免疫排斥反应。存活的SC通过提供具有收缩功能的细胞、改善心脏顺应性、 南京医科大学硕士学位论文阻断。。室重构过程改善。。功能。在不久的将来,sC可以作为基因治疗的载体,移植存活后在心梗局部微环境或人为诱导下表达重组基因,发挥治疗作用。自体 S C移植为终末期缺血性心脏病的治疗提供了一条新的途径。
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