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目的(1)观察葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用的特点及细胞形态学的变化情况。(2)检测不同浓度的葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况。(3)探讨葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞中Survivin在分子和蛋白水平的表达情况。(4)分析葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其对其凋亡相关基因的影响,对葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡的机制做初步的探讨。方法(1)在第一部分细胞培养实验中,采用细胞形态学观察、HE染色、MTT法观察葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞细胞形态学的变化及增殖抑制作用情况影响。(2)第二部分实验中,选取原花青素浓度在25μg/ml,分别与卵巢癌SKOV3细胞作用24h、48h、72h后,PI细胞周期、Annexin V-FITC双染和TUNEL及Caspase-3活性的检测等方法观察原花青素作用后,对卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况的影响。(3)第三部分实验中,选取原花青素浓度在25μg/ml,分别与卵巢癌SKOV3细胞作用24h、48h、72h后,免疫组织化学DAB染色法测定SKOV3细胞中Survivin的表达情况。应用RT-PCR和Western-blot的方法检测卵巢癌SKOV3细胞内Survivin分子水平和蛋白水平的表达变化情况。结果(1)SKOV3细胞形态学和HE染色发现,原花青素作用后,细胞膜皱缩,体积缩小。MTT法检测后得出,原花青素作用时间越长,药物浓度越高,抑制细胞增殖现象越明显。(2)流式细胞仪、TUNEL及Caspase-3活性的检测显示,原花青素的诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用,同样呈时间和剂量依赖性,同时发现葡萄籽原花青素可以激活细胞内Caspase-3的表达活性。(3)葡萄籽原花青素可以明显降低细胞内Survivin在分子和蛋白水平的表达。结论(1)葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞具有明显的增殖抑制作用。(2)葡萄籽提取物原花青素可以诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡,激活细胞内Caspase-3的表达。(3)葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中,可能与下调细胞内Survivin的表达有一定的关系。(4) SKOV3细胞凋亡相关基因中,Survivin与Caspase-3的表达呈负相关。