复方茵陈制剂对动物保肝作用机理的研究

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目的:研究复方茵陈制剂的药动学、药效学及其保肝的作用机理,利用反相高效液相色谱法测定了复方茵陈制剂中黄芩苷的含量,建立了质控指标;研究复方茵陈制剂在小鼠体内的药物代谢动力学,计算出动力学参数;研究复方茵陈制剂对体内急性CCL4肝损伤和体外H2O2肝细胞损伤的保护作用及其作用机理,旨在为复方茵陈制剂的临床应用提供科学依据。 方法: (1)采用反相高效液相色谱法测定复方茵陈制剂中黄芩苷的含量。色谱条件如下:Hanbon C18柱,甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。含量测定采用外标法。 (2)按5.5g/kg,11g/kg,16.5g/kg的剂量分别对小鼠连续给药4d,第3d颈部皮下注射0.5%的四氯化碳(CCL4)-花生油溶液(0.1mL/10g),分离血浆和肝脏,研究复方茵陈制剂对急性肝损伤的组织学变化及其对碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase AKP)、丙氨酸转氨酶(Alanine aminitransperase ALT)、天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase AST)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutanthione peroxidese GSH-Px)的活力、丙二醛(maleicdialdehyde MDA)含量的影响。 (3)按16.5g/kg的剂量给小鼠口服复方茵陈制剂,用高效液相色谱法检测用药后不同时间0.25,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0,12.0,14.0,16.0,20.0,24.0h血浆中药物黄芩苷的质量浓度,研究在小白鼠体内的药物动力学。 (4)血清药理学试验,采用体外培养法获取小鼠肝细胞,以细胞活率为指标,比较了肝组织块外植培养、肝组织块直接过筛法和胶原酶分离法的分离效果。用H2O2对新鲜分离的小鼠原代肝细胞建立体外损伤模型。检测不同时期给药后,肝细胞培养上清液AST、ALT、SOD、MDA的释放量,比较含药血清不同时间对肝细胞保护的影响。 结果: (1)黄芩苷在12~240ug/mL范围内线性关系良好,以浓度对峰面积的响应值回归,得线性方程为Y=2.39e+004x-3.62e+004,r=0.9985。日内精密度RSD为5.76%,重复性RSD为0.51%,经稳定性考察,样品在24h内稳定性良好,其
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