【摘 要】
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目的探讨和厚朴酚在体外对人舌鳞癌CAL-27细胞的增殖、迁移和凋亡的影响,为临床上治疗舌癌提供理论依据。方法采用含10%胎牛血清的培养基(DMEM)培养CAL-27细胞。并将其分为对照组和3个实验组,实验组分别加入20、40、60μmol/L的HNK进行处理。用(噻唑蓝)MTT法检测不同浓度HNK对CAL-27细胞增殖的影响;划痕实验观察CAL-27细胞迁移能力;三氯化氢2-(4-乙基苯基)-5-
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目的探讨和厚朴酚在体外对人舌鳞癌CAL-27细胞的增殖、迁移和凋亡的影响,为临床上治疗舌癌提供理论依据。方法采用含10%胎牛血清的培养基(DMEM)培养CAL-27细胞。并将其分为对照组和3个实验组,实验组分别加入20、40、60μmol/L的HNK进行处理。用(噻唑蓝)MTT法检测不同浓度HNK对CAL-27细胞增殖的影响;划痕实验观察CAL-27细胞迁移能力;三氯化氢2-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑(Hoechst33342)荧光染色法和Annexin V-FITC/PI法检测CAL-27细胞凋亡数及凋亡率;Western blot检测CAL-27细胞内磷酸化-磷脂酰肌醇3-激酶(p-Pi3k)、磷酸化-丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化-半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase-3)、磷酸化-局部粘着斑激酶(p-Fak)、局部粘着斑激酶(Fak)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的蛋白表达量。结果HNK(0、20、40、60μmol/L)处理24 h后CAL-27细胞增殖、迁移能力减弱;且随HNK浓度增大细胞凋亡数升高,凋亡率分别为(6.53±1.80)%、(15.24±2.06)%、(35.03±2.42)%、(48.13±4.61)%,细胞内p-Pi3k、p-Akt、p-Fak、MMP2、MMP9和Bcl-2、蛋白表达量减少而Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量增加(P<0.01)。结论HNK能抑制CAL-27细胞体外增殖及迁移,同时还能诱导其凋亡,作用机制可能与上调细胞内Bax和Cleaved-Caspase-3的蛋白表达量、下调细胞内p-Pi3k、p-Akt、p-Fak、MMP2、MMP9和Bcl-2的蛋白表达量有关。
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