【摘 要】
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威兰胶是由革兰氏阴性菌Alcaligenes sp.分泌的一种新型胞外多糖,由于其具有优良的稳定性、剪切稀释性、增稠性、悬浮性和乳化性,在建筑、石油开采和印染等领域具有广泛的应
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威兰胶是由革兰氏阴性菌Alcaligenes sp.分泌的一种新型胞外多糖,由于其具有优良的稳定性、剪切稀释性、增稠性、悬浮性和乳化性,在建筑、石油开采和印染等领域具有广泛的应用前景。但由于现阶段提取工艺的限制,导致威兰胶中含有大量的菌体和蛋白质,使得其在食品、化妆品及医药领域的应用受到了限制。首先,本论文利用鞘氨醇单孢杆菌(Sphingomonas sp.WG)作为生产威兰胶的菌株,尝试了利用离心法去除威兰胶发酵液中菌体的可能性,通过对相对离心力、稀释倍数等的优化发现,离心操作无法将威兰胶和菌体进行分离。随后,采用溶菌酶酶解法对菌体的去除进行了研究,经过参数优化,获得的最佳酶解工艺为:反应温度40℃,溶液pH值为6.5,加酶量1%,搅拌速率为600 rpm。在此条件下,酶解法可去除发酵液中86.2%的菌体。另外,实验结果表明,威兰胶粗品的制备过程又可以去除40%的剩余菌体,使最终的菌体去除率达91.7%。其次,本论文选用乙醇作为沉淀剂,对威兰胶粗品的制备工艺进行了设计和优化,最终获得的最佳制备工艺为:发酵液与乙醇的混合比例为1:5.5(体积比),乙醇沉淀温度和时间分别为20℃、6 h,威兰胶沉淀物采用过滤分离,样品最后经冷冻干燥处理。最后,本论文利用单因素法和响应面法对威兰胶粗品脱除蛋白质的酶解工艺进行了研究,获得的最佳酶解工艺为:反应温度49.2℃,溶液pH值为2.45,酶底比4.74%,搅拌速率为530 rpm。在此条件下,蛋白质的去除率达到95%。
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