糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(Diabetes mellitus，DM)慢性微血管并发症之一，是导致终末期肾衰竭的主要原因，严重影响了患者的生活质量和危害患者的生命健康。DN的发病机制非常复杂，尚未完全清楚，目前认为是多种复杂的因素，如糖代谢异常、肾脏血流动力学、蛋白质非酶糖基化、氧化应激、多元醇通路激活、遗传易感基因等综合作用的结果。近年来，醛糖还原酶在糖尿病慢性并发症包括DN的发生所起的作用日益受到关注。醛糖还原酶(AR)是多元醇通路中重要的限速酶，持续高血糖刺激下，醛糖还原酶被激活，通过活化多元醇通路，启动了一系列过程如高渗应激，葡萄糖及脂质的氧化应激，蛋白的非酶糖基化等单独或协同作用损伤肾脏微血管内皮细胞、。肾小球和肾小管细胞，引起细胞外基质增加，系膜扩张，肾脏肥大，从而导致糖尿病肾病的发生。p38MAPK是高糖致糖尿病肾病发病的重要的信号传递分子，p38MAPK信号通路是细胞信号传递的交汇点或共同通路。目前研究认为，细胞内高糖刺激下，多元醇通路激活后可以通过二酯酰甘油(DAG)-PKC通路、氧化应激、蛋白质非酶糖基化等环节最终导致p38MAPK通路的激活，进而磷酸化转录因子，调节与细胞生长、增殖、分化和细胞外基质蛋白相关基因的表达，促进或加重糖尿病慢性并发症的病变过程。 黄连素(berberine，[C<,20>H<,18>NO<,4>]<+>，又称小檗碱)是从小檗属植物黄连(Coptidis Rhizoma，CR)、黄柏(Cortex Phellodendri)根茎中提取出的一种异喹啉类生物碱。既往大量研究证实：黄连素具有降血糖、降血脂、降血压，抑制醛糖还原酶、抗氧化等药理活性，这些研究显示了黄连素作为防治糖尿病并发症用药具有一定的临床价值和应用前景。近年来有研究发现：黄连素可以明显改善2型糖尿病大鼠的肾脏损害，保护。肾功能，延缓糖尿病肾脏病变的发生和发展。目前，尚未见到从影响醛糖还原酶/p38 MARK信号通路研究黄连素抗糖尿病肾病的作用机制的研究报道。因此，在前人研究基础上，本课题通过体内、体外实验观察黄连素对糖尿病肾损伤大鼠肾功能的保护作用，对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞细胞增殖与胶原合成的影响，从醛糖还原酶/p38 MARK信号转导通路方面探讨黄连素抗糖尿病肾病可能的作用机制。 第一章黄连素对糖尿病肾损伤大鼠肾功能保护作用及醛糖还原酶的影响(体内实验)研究目的1、观察黄连素对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾损伤大鼠肾功能的保护作用2、观察黄连素对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾损伤大鼠氧化应激、肾脏醛糖还原酶活性及其mRNA和蛋白表达的影响研究方法1、模型复制、分组、给药：35只Wistar大鼠，体重为250+20g，禁食6小时后，单次腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素(STZ，以枸椽酸钠溶液稀释，PH4.0，冰盒中新鲜配制)复制糖尿病大鼠模型。注射72h后测血糖，以禁食6h血糖≥16.7mmol/L，者，为糖尿病模型大鼠。选取糖尿病模型大鼠20只，随机分为模型组、黄连素组，每组各10只。选同批次10只正常大鼠做为正常对照组。糖尿病模型复制成功后次日，黄连素组大鼠给予0.5％醋酸纤维素钠溶液制成的黄连素混悬液，灌胃，剂量为0.2g/kg。模型组和正常对照组给予等体积的0.5％醋酸纤维素钠溶液。每日给药时间8-9am，每周给药6天，共观察12周。实验期间大鼠自由进食、饮水，不使用胰岛素等降糖药物。 的临床价值和应用前景。近年来有研究发现：黄连素可以明显改善2型糖尿病大鼠的肾脏损害，保护肾功能，延缓糖尿病肾脏病变的发生和发展。目前，尚未见到从影响醛糖还原酶/p38 MARK信号通路研究黄连素抗糖尿病肾病的作用机制的研究报道。因此，在前人研究基础上，本课题通过体内、体外实验观察黄连素对糖尿病肾损伤大鼠肾功能的保护作用，对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞细胞增殖与胶原合成的影响，从醛糖还原酶/p38 MARK信号转导通路方面探讨黄连素抗糖尿病肾病可能的作用机制。