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目的：构建S100A13真核表达载体,观察高表达S100A13基因对肝癌HepG2细胞周期的影响,探讨S100A13基因在肝癌发生中的作用。方法：提取本实验室保存的pGEM-T-S100A13载体菌种JM109质粒,设计引物进行PCR扩增。PCR产物克隆至pcDNA3.2/V5-topo载体,构建pcDNA3.2/V5-S100A13真核表达载体,转化Top10大肠杆菌,经氨苄筛选得到阳性克隆,摇菌扩增、提取质粒进行PCR鉴定并对插入序列进行测序鉴定。应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pcDNA3.2/V5-S100A13和空载体pcDNA3.2/V5导入HepG2细胞系,48小时后间接免疫荧光法观察S100A13蛋白亚细胞定位,并应用流式细胞术检测高表达S100A13基因对HepG2细胞周期的影响。结果：成功构建了S100A13真核表达载体pcDNA3.2/V5-S100A13。转染HepG2后48小时绿色荧光观察结果显示,HepG2-V5-S100A13组绿色荧光均匀分布于整个细胞,而HepG2-V5组和HepG2组绿色荧光胞浆分布明显减少,主要集中在胞核。流式细胞仪检测HepG2-V5-S100A13、HepG2-V5和HepG2三组细胞,S期的细胞比例分别为(24.90±0.66)%、(17.11±0.23)%和(16.7±0.36)%(P<0.01),G2/M期的细胞比例分别为(12.19±0.14)%、(7.26±0.23)%和(7.51±0.28)%(P<0.01)。结论：成功构建了S100A13基因真核表达载体HepG2-V5-S100A13,高表达S100A13基因能够促进HepG2细胞G1期向S期及G2/M期转化,内源性S100A13在HepG2细胞中主要定位于胞核,而外源性S100A13定位于胞质。