5-氨基乙酰丙酸为非蛋白类的五碳氨基酸其中的一种,在很多微生物以及动植物细胞中存在。在生物体内代谢过程中有着至关重要的作用,5-ALA是VB12、亚铁血红素和叶绿素等吡咯化合物的关键中间产物。它的特点为无毒性,但其稳定性较差常温下容易降解,并有无残留的特点,被公认为是一种绿色环保化学品。5-ALA可以通过化学合成以及微生物发酵两个途径合成。化学方法合成5-ALA的反应所要具备的条件比较多并且难度大,反应步骤繁琐,生成的副产物较多,分离提纯比较难,工艺非常复杂,又因为化学试剂成本费用较高、不易获得、含有毒性、产率低,因此生物发酵成为未来研究发展的主要趋势。其还可以通过C4和C5途径得到。通常是诱变菌株对工程菌进行改造,再优化发酵条件使5-ALA得到积累。5-氨基乙酰丙酸市场需求很大,在农业、医药、食品等行业被广泛应用。实验通过构建含有ssrA标签的hemB基因过表达重组质粒及菌株,实现了 5-氨基乙酰丙酸脱水酶的可控降解,从而降低生物体内胆色素原合成酶的活性,使得丙酸杆菌中ALA的含量得到增加。实验运用基因工程技术设计了hemB 和ssrA引物,通过对目的片段扩增、转化及蓝白斑筛选、双酶切验证后,完成了 pKHEM04-hemB1-ssrA载体的构建,并转入丙酸杆菌感受态细胞成功表达。通过SDS电泳检验,检测得到大约为50 kDa的蛋白条带。并对菌株pKHEM04-hemB1、pKHEM04-hemB1-ssrA分别进行5-ALA含量测定,含量分别为26mg/L,35mg/L,含量增加,达到预期的目的。