论文部分内容阅读
目的:观察超声辐照靶向破坏携单酰基甘油脂肪酶沉默基因（monoacylglycerol lipase short hairpin RNA, MAGL-shRNA）的超声微泡在大鼠肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）组织中转染效果及对HCC转移的作用。方法:二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine, DEN）诱导建立大鼠肝细胞肝癌模型，病理活检和二维超声判定肝脏成瘤情况。抽取40只SD大鼠随机分成四组，分别为PBS液组、MAGL-shRNA质粒微泡组（MAGL-shRNA+microbubble, MB）、空白质粒微泡+超声辐照组（microbubbles+ultrasound, MB+US）、MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组（MAGL-shRNA+MB+US）。每只大鼠经尾静脉注射1ml液体，对MB+US组和MAGL-shRNA+MB+US组大鼠肝区同时给予超声辐照，辐照条件为300kHz，2W/cm~2，辐照10s，间隔10s，共20min。Western-Blot检测大鼠HCC组织MAGL蛋白的表达，免疫组化检测肝组织MAGL、基质金属蛋白酶2（matrixmetalloproteinase-2, MMP-2）、CD34和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）的表达。记录各组大鼠的生存时间和观察肝细胞肝癌转移情况，比较各组差异。结果: MAGL在肝细胞肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织（P<0.05）；超声微泡携MAGL-shRNA可以在HCC组织被超声辐照击破后靶向释放，在各组HCC组织中均有MAGL蛋白的表达，其中MAGL-shRNA+MB+US组蛋白表达量明显低于其它组（P<0.01）；免疫组织化学检测MAGL-shRNA+MB+US组MMP-2、CD34和PCNA表达均低于其它各组（P<0.01）；MAGL-shRNA+MB+US组大鼠存活的时间明显长于其它各组（P<0.05），各组动物均见肿瘤转移，但MAGL-shRNA+MB+US组转移率最低（P<0.05）。结论:超声辐照可破坏携MAGL-shRNA的微泡使之靶向释放并增强了MAGL-shRNA的转染效率，MAGL-MMP-2通路可能与HCC的转移相关。